02蛋白质化学1解析.ppt

二、氨基酸的分类和结构 酸碱性：中性、酸性、碱性 R基结构：脂肪、芳香、杂环 R基物理性质 ：疏水、亲水 R基结构： 氨基酸等电点决定于可解离基团 含脑啡肽的神经元与疼痛 SP： P物质-神经末梢释放兴奋递质 E:脑啡肽-与阿片受体结合，减少感觉神经末梢释放P物质 2.用阳离子交换树脂分离Asp和Lys，用pH7.0缓冲液洗脱，哪个氨基酸先被洗脱下来？ 茚三酮是一个有机化合物，被广泛用于检测氨、一级和二级胺，尤其是氨基酸。 脑啡肽（enkephalin），神经递质的一种。能改变神经元对经典神经递质的反应，起修饰经典神经递质的作用，故称为神经调质（neuromodulator）。 又被称为“脑内吗啡”，对脑细胞具有独特的作用，能够激活处于抑制沉睡状态的脑细胞，对因脑损伤导致的后遗症有很好的恢复作用。由葡萄糖、麦芽糖或者麦芽三糖这样的糖类与神经肽结合形成糖基化脑啡肽在药效方面是吗啡的两到三倍，而不具备其它一些造成使用者成瘾的特性。 阿片（opium）为罂粟科植物罂粟（Papaver somniferum）未成熟蒴果浆汁的干燥物，含有20余种生物碱，从化学结构上可分为菲类和异喹啉类两大类型。前者如吗啡（含量约10%）和可待因，具有镇痛作用；后者如罂粟碱，具有平滑肌松弛作用。 肼解法——C端 羧肽酶法 羧肽酶（carboxypeptidase ）：作用于肽链的游离羧基末端释放单个氨基酸。 羧肽酶 A: 除 Lys , Arg , Pro， Pro ( -2 ) 羧肽酶B： 水解 Arg , Lys , 非( Pro -2 ) 肽链的拆分 非共价键：变性剂 共价键：二硫键 过甲酸氧化法 还原法 肽链的部分水解 化学法：溴化氰（CNBr）法 酶法：胰蛋白酶 胰凝乳蛋白酶 胃蛋白酶 溴化氰（CNBr）裂解法 肽酰高丝酸内酯 专一水解甲硫氨酸羧基形成的肽键 胰蛋白酶Trypsin Lys-Pro Arg-Pro 胰凝乳蛋白酶/糜蛋白酶（chymotrypsin）：芳香族氨基酸的羧基端 ( Phe，Tyr， Trp ，不与Pro相连) 胃蛋白酶（pepsin）：断裂键的两端均为疏水氨基酸( Leu-Val) 胰蛋白酶 胰凝乳蛋白酶/糜蛋白酶 嗜热菌蛋白酶 胃蛋白酶 弹性蛋白酶 内肽酶 片段重叠法 N -A-B-C-D-E-F-G-H-M-N- C ↑ ↑ ↑ ↑ 酶1 A-B-C-D E-F-G H-M-N 酶2 A-B-C D-E-F G-H-M-N 二硫键的定位 ——对角线电泳 过甲酸 练习 12肽 胰蛋白酶水解： Phe-Ala-Lys，Ser-Glu-Asn， Ala-Ile-Tyr-Met-Gly-Arg 胰凝乳蛋白酶水解： Met-Gly-Arg-Phe，Ala-Ile-Tyr， Ala-Lys-Ser-Glu-Asn Ala-Ile-Try- Met-Gly-Arg-Phe-Ala-Lys-Ser-Glu-Asn 肽链完全水解： Met，Pro，Phe，Glu，2xLys，NH3 FDNB：DNP-Phe CNBr：2肽高丝氨酸内酯，4肽 胰蛋白酶：2 x 3肽 羧肽酶A、B均阴性 →Gln →N-Phe →N-Phe-Met →N-Phe-Met-Lys →Pro-Lys-C/ Lys-Pro-C Phe-Met-Lys-Gln-Pro-Lys Phe-Met-Lys-Gln-Lys-Pro 1.一氨基酸溶于水，溶液pH为5，氨基酸pI大于、小于或等于5？ 正离子 pHpI 两性离子 pH=pI 负离子 pHpI pI5； 阳离子交换树脂 pIAsp= 2.97，pILys= 9.74 pH=7.0，Asp-；Lys+ * 脂肪烃侧链氨基酸：甘氨酸，丙氨酸，缬氨酸，亮氨酸，异亮氨酸 芳香环氨基酸：苯丙氨酸，色氨酸 亚氨基酸：脯氨酸 含硫氨基酸：甲硫氨酸 * 较非极性R基氨基酸易溶于水，侧链含不解离极性基（羟基，酰胺基，巯基）可与水成氢键。 * 生理pH 精氨酸：胍基；组氨酸：咪唑 * 平面偏振光： 光线通过尼科尔Nicol棱镜，变为只在一个平面振动的光，称为平面偏振光。 物质的旋光性：使偏振光旋转的性质 使偏振光振动平面旋转，如乳酸、葡萄糖溶液等。 旋光度： α 旋光物质使偏振光振动平面旋转的角度。 左旋体 右旋体 * Bron