叶绿素和初级生产力测定方法实验步骤.ppt

实验三; ●测定水体中叶绿素a含量和同化系数Q ●掌握初级生产力测定方法和估算;二、方法原理; 海洋初级生产力测定方法有 叶绿素法 ; ; 由于叶绿素a是浮游植物任一种群都具有的特征，而b或c不是任一种群都有，因此，通常用叶绿素a (Chl-a)表示初级生产力水平，其计算式为④式。 Ca（mg/m3）= ④ C－①式的结果； V丙酮－丙酮体积； V海水－海水体积。 ; 叶绿素a丙酮萃取液受蓝光（340nm）激发产生红色荧光，用荧光计在波长670nm处测定提取液酸化前后荧光值，按⑤式计算： ⑤ 　　　 ;因 故⑤式成为⑥式： ⑥ Rb—酸化前荧光值 Ra—酸化后荧光值 R —叶绿素a酸化因子(随仪器而异） V丙酮—丙酮提取液体积（mL） V海水—过滤海水体积（L） Fd —荧光计所用量程换算因子(mg/m3);Fd值确定的方法：;⑴标准叶绿素a校正： 用纯叶绿素a配成母液，把母液稀释成一系列不同浓度的溶液并分别测定荧光读数，用直线回归法求出标定线的斜率Fd。 ;⑵分光光度计校正(本实验采用此法)： 取一定体积处于指数生长期的单细胞藻，丙酮萃取其叶绿素a，测其吸光值E，按①式计算提取液叶绿素a浓度Cchl-a，然后在荧光计测其荧光值Rb，依⑦式计算Fd。 　 ⑦ ;Cadée和hegeman（1974）提出计算初级生产力简化公式： （8） 式中，P－每日现场初级生产力；Pa－表层水中浮游植物潜在生产力；E－真光层深度；D－每日光照时间。 ;因为表层水E＝1m水深内浮游植物潜在的生产力： （8） 故可写成： (9) PP－每日生产力（mgC/m3?d）； Ca－表层水中叶绿素-a含量（mg/m3）； D－每日的光照时间，冬天以12h计，夏天以13h计。 Q－浮游植物光合作用速率与叶绿素-a含量之比值，单位mgC(mgChl-a)-1h-1，称为同化系数。 ;4. 同化系数的确定;为得到适用于调查海区的同化系数，最好用C14示踪法现场测定。 在无测定C14示踪法条件下可用黑白瓶作浮游植物光合作用速率的测定。根据浮游植物光合过程中释放的氧量换算成有机碳的固定量，以此固定值除以叶绿素a和培养时间即为同化系数Q。 ;设符合光合作用的理想方程是CO2+H2O→CH2O+O2 则产生的氧转换成固定碳，则有： （10） Q—同化系数[mgC(mgChl-a)-1h-1] h—光照时间(h) Chl-a—叶绿素a含量(mg/m3)； Ol、Od—“白”和“黑”瓶DO(mgO2/L) ;三、实验设备;UV1600紫外光栅分光光度计;GFY－160荧光光度计 ;960MR荧光光度计 ;LRH-250-G型光照培养箱 ; 离心机; 过滤器 0.45μm微孔醋酸纤维滤膜 ;医用真空吸引器 ;2、玻璃器皿;3、试剂(*为学生自配试剂） ;四、实验内容;水样A平行样 （20～30ml）;先→ → → → → → →; 　;　　;根据表2的数据和实验步骤3的结果，按⑨式计算该样水域的初级生产力水平PP。 ;五、数据处理和问题讨论;六、注意事项;锹伊馒凤鹃殴箱攀几扭靶佯冤儡倡裂褒谷肪淋切霸征赛删以弹吱牛聊脑畏叶绿素和初级生产力测定方法实验步骤叶绿素和初级生产力测定方法???验步骤