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瘦素增强人外周血γδT细胞对肺癌细胞杀伤作用的实验研究的中期报告
本研究旨在探究瘦素对人外周血γδT细胞对肺癌细胞杀伤作用的影响。经过初步实验观察,我们发现瘦素可能具有促进γδT细胞对肺癌细胞杀伤作用的作用。以下是我们的中期报告。
实验方法:
1. 首先采集健康志愿者的外周血,从中分离纯化γδT细胞,经过细胞培养、诱导和激活处理后获得活化的γδT细胞;
2. 选择肺癌H1299细胞株为靶细胞,将其共同培养于96孔板上,细胞密度约为1x10^5/孔;
3. 活化的γδT细胞分别与肺癌H1299细胞共同培养,比例为1:1、2:1和4:1,加入瘦素处理组和对照组,瘦素处理组瘦素处理浓度为100 ng/mL,对照组加入等量无菌PBS,培养24小时;
4. 使用MTT法检测各组细胞的增殖率,并计算出细胞的增殖率抑制率;
5. 使用流式细胞仪对各组细胞进行检测,包括外周血γδT细胞表面标记分析、NK细胞表面标记分析和肺癌细胞凋亡分析等。
实验结果:
1. 经过MTT法检测,我们发现在瘦素作用下,外周血γδT细胞的对H1299细胞的杀伤率明显增强,而对照组γδT细胞的增殖率与杀伤率没有明显差异;
2. 流式细胞仪检测发现,瘦素处理组的外周血γδT细胞中表达较多的肿瘤溶解天然杀伤细胞(NK)相关抗原CD16,而对照组的γδT细胞中表达较多的不活化表面标记CD16;
3. 同时,肺癌细胞的凋亡率在瘦素处理组显著增强,而对照组没有明显的凋亡率变化。
实验结论:
经过实验观察,我们发现瘦素可能具有增强γδT细胞对肺癌细胞杀伤作用的作用。在瘦素作用下,外周血γδT细胞表面标记和功能得到明显激活,具有更强的杀伤效果。下一步我们将进一步深入研究瘦素对γδT细胞的作用机制,并考虑将其作为治疗肺癌的新策略。
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