分子生物学新技术及其应用课件.pptx

分子生物學新技術及其應用;代謝組學及研究技術

microRNA的研究及應用

免疫共沉澱技術（Co-Immunoprecipitation）

4.胞內RNA分子可視技術;第一節代謝組學及其研究進展;代謝組學研究什麼？？;體內各種物質代謝過程互相聯繫形成一個整體;機體物質代謝不斷受到精細調節;代謝組(metabolome)是指一個細胞、組織或器官中所有代謝物的集合,包含一系列不同化學型的分子,比如肽、碳水化合物、脂類、核酸以及異源物質的催化產物等。

代謝組學(metabonomics／metabolomics)來源於代謝組一詞,是研究一個細胞、組織或器官中所有小分子代謝組分集合的科學。代謝組學研究的目的是定量分析一個生物系統內所有代謝物的含量。;代謝組學分析可以指示細胞、組織或器官的生化狀態,協助闡釋新基因或未知功能基因的功能,並且可以揭示生物各代謝網路間的關聯性,幫助人們更系統地認識生物體。進行代謝組學研究涉及生命科學、分析科學以及化學統計學三大方面的專業知識。

代謝物化學分析技術及數據分析技術的發展極大促進了諸多生物、醫學問題的研究,這些知識的綜合運用使得代謝組研究在疾病診斷、藥理研究以及臨床前毒理等研究中發揮了極為重要的作用。;普遍定義;特點;代謝組學的發展;研究方法;應用;連接圖資料庫ConnectionsMapDB

京都基因與基因組百科全書KEGG

(http://www.genome.jp/kegg/ligand.html)

生物化學途徑ExPASy

互聯網主要代謝途徑mainmetabolicpathwaysonInternert,MMP

Duke博士植物化學和民族植物學資料庫

Arizona大學天然資料庫

Wiley_handbookofgc-ms

新藥及其代謝產物質譜庫

http://www.ualberta.ca/_gjones/mslib.htm

“腫瘤”代謝組資料庫

Pubmed化合物資料庫

NIST質譜資料庫

/srd/nistl.htm;代謝組學分析技術;分析技術;質譜儀的基本結構及工作流程;幾種新的GC-MS技術;研究實例;GC-MS適用於揮發性的代謝物。對於非揮發性代謝物的分析需要經過化學衍生。

多用於環境分析、大氣有毒氣體分析、某些疾病診斷等。;2.液相色譜-質譜聯用技術（LC-MS）

LC工作原理：

;液相色譜-質譜聯用的新技術;高效液相色譜系統配合液相質譜系統。健康??慢性乙肝病人的血清樣本。;新型液相色譜技術UPLC;比較（a）HPLC和（b）UPLC用於美沙芬的代謝物TOP質譜全掃描（RapidCommunMassSpectrom,2005,19,843）;UPLC在代謝組學中的研究優勢;毛細管電泳-質譜聯用技術（CE-MS）;毛細管電泳-質譜聯用分析儀（蘭州理工大學）

型號：P/ACEMDQ-DecaXPplus

廠家：美國BeckanCoulter-Finnigan

;（NMR）;核磁共振;hr-MASofbiologicaltissue;代謝組學研究一般包括四個步驟：

第一步，給予生物體一定的刺激。

第二步，代謝組數據的採集。用核磁共振、質譜、色譜等分析手段測定其中代謝物的種類、含量和狀態以及其變化。;35;10.1.1概述

10.1.2.microRNA的分子生物學研究方法

10.1.3microRNA的實驗技術

10.1.4microRNA與疾病

;37;38;39;MicroRNA的起源與生物合成過程;41;42;43;44;MicroRNA的鑒定;MicroRNA的特徵;MicroRNA的功能;48;49;MicroRNA的調控機制;MicroRNA表達的研究方法;52;MicroRNA功能研究方法;miRNA基因克隆;56;miRNA基因克隆的基本步驟;miRNA基因克隆的基本步驟;PAGE/Northernblotting;PAGE/Northernblotting基本操作步驟;PAGE/Northernblotting基本操作步驟;MicroRNA基因晶片技術;MicroRNA基因晶片技術;64;MicroRNA基因晶片技術操作流程;MicroRNA基因晶片技術操作流程;MicroRNA即時定量PCR;MicroRNA即時定量PCR;69;MicroRNA即時定量PCR操作步驟;MicroRNA與疾病;microRNA引發癌症的可能原因：

（1）microRNA與細胞的增殖、分化、凋亡密切相關，而腫瘤則是由細胞增殖、分化、凋亡功能紊亂而引發的；

（2）許多microRNA的基因位於基因組中易