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耻垢分枝杆菌MSMEG_1401基因的克隆、表达及其对细胞壁多糖代谢的影响的开题报告

题目：耻垢分枝杆菌MSMEG_1401基因的克隆、表达及其对细胞壁多糖代谢的影响

一、研究背景

耻垢分枝杆菌是一种常见的耐药性细菌，能够引起肺结核、骨髓炎等疾病。该菌具有复杂的细胞壁结构和代谢途径，对其进行研究有助于深入了解其病原性及耐药机制。

细胞壁多糖是细胞壁的基本成分之一，对细胞的结构和功能具有重要作用。耻垢分枝杆菌细胞壁多糖主要包括酸性多糖和非酸性多糖两类，而其代谢途径目前尚不明确。

MSMEG_1401基因编码一种磷酸乙醇胺醇基转移酶，其功能尚未完全阐明。因此，对其进行研究有助于深入了解耻垢分枝杆菌的细胞壁多糖代谢途径及其调控机制。

二、研究目的

本研究旨在克隆和表达耻垢分枝杆菌MSMEG_1401基因，分析其对细胞壁多糖代谢的影响，探索经过该基因调节的耻垢分枝杆菌多糖合成途径。

三、研究内容

1.克隆耻垢分枝杆菌MSMEG_1401基因并进行测序验证。

2.构建表达该基因的重组质粒，并经PCR、酶切和测序鉴定。

3.采用大肠杆菌表达系统表达目的蛋白，并进行纯化。

4.对表达蛋白进行功能分析，包括分子生物学实验、免疫学实验和生化实验等。

5.对耻垢分枝杆菌进行多糖含量测定、细胞壁结构观察等实验，探究该基因对细胞壁多糖合成途径的调节作用。

四、研究意义

1.该研究可深入了解耻垢分枝杆菌的多糖合成途径，有助于探究其病原机制及耐药机制。

2.通过研究MSMEG_1401基因，可以为开发新型治疗耻垢分枝杆菌感染的药物提供理论基础。

3.该研究对耻垢分枝杆菌的基础研究具有参考价值，对相关领域的研究有一定推动作用。

五、研究进度安排

1.克隆耻垢分枝杆菌MSMEG_1401基因并进行序列测定：4周。

2.构建表达该基因的重组质粒，并鉴定：2周。

3.大肠杆菌表达和纯化目的蛋白：4周。

4.对表达蛋白进行功能分析：6周。

5.耻垢分枝杆菌多糖合成途径调节作用的实验：8周。

6.论文撰写及提交：4周。

总计28周。