亮氨酸调节自噬的信号通路研究的中期报告.docx

亮氨酸调节自噬的信号通路研究的中期报告 自噬是一种重要的细胞自我代谢过程，参与维持细胞正常生理功能和对各种应激情况的适应性。近年来研究表明，亮氨酸是一种重要的调节自噬的信号分子，但其具体机制还不清楚。本研究旨在探讨亮氨酸调节自噬的信号通路。 首先，我们在小鼠肝脏中建立了亮氨酸缺乏模型和亮氨酸补充模型，通过Western blot检测自噬相关蛋白LC3B和p62的表达，结果发现亮氨酸补充组的LC3B-II/LC3B-I比值明显增加，而p62表达水平下降，说明亮氨酸可以促进自噬的进行。为了进一步探究亮氨酸调节自噬的分子机制，我们使用荧光探针检测了亮氨酸处理后细胞内钙离子水平的变化，结果显示亮氨酸处理能够显著增加细胞内钙离子水平。同时我们发现，亮氨酸还可以诱导AMPK的磷酸化，并上调ULK1和Beclin-1的表达，这些变化都是自噬促进的标志。 此外，为了探索亮氨酸调节自噬具体的分子机制，我们进一步用siRNA knockdown亮氨酸刺激后上调的ULK1和Beclin-1，结果发现降低ULK1的表达可以减轻亮氨酸诱导的自噬增加，而降低Beclin-1的表达则不能减弱亮氨酸诱导的自噬增加，这提示ULK1在亮氨酸调节自噬中扮演着更为重要的角色。 综上所述，我们的研究表明，亮氨酸可以通过上调ULK1和Beclin-1的表达来促进细胞自噬的进行，并且通过AMPK的激活和细胞内钙离子水平的升高来调节ULK1和Beclin-1的表达。此外，ULK1在亮氨酸促进自噬中具有更为重要的作用。这些发现有望为进一步研究自噬和营养代谢、疾病防治等方面提供理论支持和实验基础。