siRNA 沉默 CD46基因表达对乳腺癌 MCF-7细胞增殖及转移能力的影响.pdf

·５６４ · 临床外科杂志２０１４ 年８月第２２卷第８期　Ｊ Ｃｌｉｎ Ｓｕｒｇ，Ａｕｇｕｓｔ２０１４，Ｖｏｌ．２２，Ｎｏ．８ ·论著 · ｓｉＲＮＡ沉默 ＣＤ４６基因表达对乳腺癌 ＭＣＦ７ 细胞增殖及转移能力的影响 李杰　李静 　　［摘要］　目的　构建并观察ＣＤ４６ｓｉＲＮＡ对人乳腺癌ＭＣＦ７ 细胞增殖、侵袭及转移能力的影 响。方法　构建ｐＥＧＦＰＣ１ＣＤ４６ ｓｉＲＮＡ并转染ＭＣＦ７ 细胞，检测ＣＤ４６ ｍＲＮＡ及蛋白的表达水平 变化，观察ＭＣＦ７／ＣＤ４６ｓｉＲＮＡ 细胞侵袭及迁移能力变化。结果　与对照组及乱序组相比，沉默组 ＭＣＦ７ 细胞ＣＤ４６ ｍＲＮＡ相对表达量显著降低（Ｐ＜０．０５），ＣＤ４６ 蛋白表达也显著被抑制。随着时 间的延长，对照组和乱序组ＭＣＦ７ 细胞增殖活力逐渐升高，而沉默组ＭＣＦ７ 细胞增殖活力升高不 明显。第３、４天时，三组细胞增殖活力差异有统计学意义，且沉默组均显著低于其他两组（Ｐ ＜ ０．０５）。对照组及乱序组ＭＣＦ７ 细胞侵袭及迁移计数显著高于沉默组（Ｐ＜０．０５）。结论　ｐＥＧＦＰ Ｃ１ＣＤ４６ ｓｉＲＮＡ表达载体能够有效抑制乳腺癌ＭＣＦ７ 细胞 ＣＤ４６ 基因及蛋白表达，可以降低乳腺 癌细胞增殖活力、侵袭及迁移能力。 ［关键词］　乳腺癌；　 ＣＤ４６；　 增殖；　 侵袭；　 迁移 ［中图分类号］Ｒ７３７．９　 ［文献标识码］Ａ　 ［ＤＯＩ］１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００５６４８３．２０１４．０８．００９ Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ＣＤ４６ｓｉＲＮＡ ｓｉｌｅｎｃｉｎｇ ｏｎ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ａｎｄ ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ ｏｆ ＭＣＦ７ ｈｕｍａｎ ｂｒｅａｓｔ ｃａｎｃｅｒ ｃｅｌｌ　ＬＩＪｉｅ，ＬＩＪｉｎｇ．（Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆＴｗｏ Ｔｕｍｏｒ，ＣｅｎｔｅｒＨｏｓｐｉｔａｌ ｏｆＣａｎｇｚｈｏｕ，Ｈｅｂｅｉ０６１０００，Ｃｈｉｎａ） ［Ａｂｓｔｒａｃｔ］　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏ ｅｓｔａｂｌｉｓｈ ａｎｄ ｏｂｓｅｒｖｅ ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ＣＤ４６ｓｉＲＮＡ ｏｎ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ，ｉｎ ｖａｓｉｏｎ ａｎｄ ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ ｏｆ ＭＣＦ７ ｈｕｍａｎ ｂｒｅａｓｔ ｃａｎｃｅｒ ｃｅｌｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ｔｈｅ ｐＥＧＦＰＣ１ＣＤ４６ ｓｉＲＮＡ ｗａｓ ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ ａｎｄｔｒａｎｓｆｅｃｔｅｄｉｎｔｏｔｈｅ ＭＣＦ７ ｃｅｌｌ．Ｃｈａｎｇｅｓｉｎ ＣＤ４６ ｍＲＮＡ ａｎｄｐｒｏｔｅｉｎｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｗｅｒｅｔｅｓｔ ｅｄ ａｎｄｖａｒｉａｔｉｏｎｏｆｉｎｖａｓｉｏｎａｎｄｍｉｇｒａｔｉｏｎｃａｐａｃｉｔｙｉｎＭＣＦ７／ＣＤ４６ｓｉＲＮＡｃｅｌｌｗａｓａｌｓｏｏｂｓｅｒｖｅｄ．Ｒｅｓｕｌｔｓ 　Ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ ａｎｄ ｓｃｒａｍｂｌｅｄ ｇｒｏｕｐ，ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆＣＤ４６ ｍＲＮＡ ｗａｓ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｄｅｃｒｅａｓｅｄ（Ｐ＜０．０５）ａｎｄ ＣＤ４６ ｐｒｏｔｅｉｎ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｗａｓ ａｌｓｏ ｓｕｐｐｒｅｓｓｅｄ ｉｎ ｔｈｅ ＭＣＦ７ ｃｅｌｌｓ ｏｆｔｈｅ ｓｉｌｅｎｃｅ ｇｒｏｕｐ．Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ＭＣＦ７ ｃｅｌｌ ｉｎ ｔｈｅ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ ａｎｄ ｓｃｒａｍｂｌｅｄ ｇｒｏｕｐ ｗａｓ ｇｒａｄｕａｌｌｙ ｉｎ ｃｒｅａｓｅｄ ｗｉｔｈｔｈｅｔｉｍｅ，ｂｕｔｔｈｉｓｐｈｅｎｏｍｅｎｏｎｗａｓｎｏｔｏｂｖｉｏｕｓｉｎｔｈｅ ｓｉｌｅｎｃｅｇｒｏｕｐ．Ａｔｔｈｅ３ｔｈａｎｄ４ｔｈｄａｙａｆ ｔｅｒｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ，ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ ｉｎ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｗｅｒｅ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ａｍｏｎｇ ｔｈｅ ｇｒｏｕｐｓ，ａｎｄ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｉｎ ｔｈｅ ｓｉｌｅｎｔｇｒｏｕｐｗａｓｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｌｏｗｅｒｔｈａｎｔｈｅ ｏｔｈｅｒｔｗｏ ｇｒｏｕｐｓ（Ｐ＜０．０５）．Ｃｏｕｎｔｓｉｎ ｉｎｖａｓｉｏｎ ａｎｄ ｍｉｇｒａｔｉｏｎ ｏｆＭＣＦ７ ｃｅｌｌ ｉｎ ｔｈｅ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ ａｎｄ ｓｃｒａｍ