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RNA干扰EpCAM基因对肝癌MHCC97H细胞的生物学行为的影响的开题报告
一、研究背景
肝癌作为世界上发病率和死亡率较高的恶性肿瘤,对人类健康造成了极大的危害。EpCAM(Epithelialcelladhesionmolecule)是一种跨膜糖蛋白,在肿瘤细胞中高表达并参与肝癌的发生、发展和转移。因此,抑制EpCAM的表达可能成为治疗肝癌的一种新策略。RNA干扰技术具有针对性强、作用效果明显、技术简便等优点,现已广泛应用于基因功能研究和抗肿瘤治疗领域。
二、研究目的
本研究旨在使用RNA干扰技术降低肝癌MHCC97H细胞中EpCAM的表达,观察其对细胞增殖、细胞周期、凋亡和迁移能力的影响,探讨EpCAM在肝癌发展中的作用。
三、研究内容
1.构建EpCAM特异性siRNA及质粒载体;
2.转染MHCC97H细胞,筛选出表达效果良好的siRNA;
3.Westernblot检测EpCAM蛋白表达水平;
4.CCK-8试剂盒检测细胞增殖率;
5.流式细胞术检测细胞周期变化;
6.AnnexinV-FITC/PI双染实验检测细胞凋亡率;
7.Transwell实验检测细胞迁移能力。
四、预期结果
通过RNA干扰EpCAM基因,预计可以抑制肝癌MHCC97H细胞的增殖和迁移能力,同时增加细胞凋亡率。这些结果将有助于深入了解EpCAM在肝癌中的作用机制,为肝癌治疗的研究提供新的方法和策略。