实验葡萄糖醛酸糖苷酶gus组织化学染色检测转基因植物.pptx

实 验 目 的;实 验 原 理; 用GUS进行这些实验有如下优点：1）大多数植物组织中GUS活性的本底低；2）反应产物不扩散，在表达基因的植物细胞内积累；3）通过简单的扩散或真空渗入，底物易被植物细胞吸收。当然，也存在一些缺点：1）虽然非致死检测的研究取得了一些进展，但这一检测对于活体组织仍然不太合适；2）由于酶和产物非常稳定，因而不能真实地反映出GUS替代的那个蛋白在稳定状态下的丰度；3）在GUS表达水平很高的组织中会发生无色反应中间产物渗漏的现象，但是这可以通过在底物溶液中加入氧化剂高铁氰化钾或亚铁氰化钾或者二者都加来使这种渗漏减至最少；4）同所有的组织化学方法一样，其检测结果不是定量的。 ; 用于GUS染色的植物材料的制备方法因涉及的特定组织和器官的不同而异。例如拟南芥的根、花和叶片可以不做任何处理直接染色。但是像烟草和马铃薯这些植物的茎和叶在染色前必须切成薄片。有时特别是当操作大的组织样品时真空渗入法会有所帮助。 ;实验材料和试剂;实 验 步 骤;/sundae_meng