瓯柑果皮中总黄酮的提取及含量的测定.doc

瓯柑果皮中总黄酮的提取及含量的测定 第23卷,第4期 2006年7月 光谱实验室 ChineseJournalofSpectroscopyLaboratory Vo1.23,No.4 July,2006 瓯柑果皮中总黄酮的提取及含量的测定 杨小凤朱一力戴歌心 (温州医学院药学院化学教研室浙江省温州市325035) 摘要为了进一步开发利用瓯柑的资源,研究了瓯柑果皮中总黄酮的提取条件及含量测定结果表 明,总黄酮提取的最佳条件是:用8O乙醇在6OC下超声波提取1h,固液比为1:18,提取3次.瓯柑果皮 中总黄酮的含量为2.143,平均回收率为99.8o,RSD=0.88(=6).此结果为瓯柑药效功能的进一 步研究和资源开发利用提供科学依据. 关键词瓯柑,总黄酮,提取,分光光度法. 中图分类号:0657.32文献标识码:B文章编号:1004-8138(2006)04-0810-05 1前言 瓯柑CitrusSuavissinaHort.etTanaka是芸香科柑桔属的一个栽培变种,是浙江温州的传统特 产,为浙南佳果之一.瓯柑果皮黄色,清甜汁多,略带苦味,营养价值较高,并具有祛热生津,化痰止 咳,清凉解毒等功效.唐代以来曾列为贡品,成为温州最具代表性的水果.在温外I民间素有”端午瓯 柑似羚羊”之说,并广泛流传瓯柑可退烧,冶咽喉炎,头痛等热性疾病.目前,瓯柑的肉汁供食用和食 品工业外,果皮一般遗弃成为污染环境的废物.我们在对瓯柑的研究中发现:皮中的微量元素含量 普遍高于果肉中的微量元素的含量[1],为了有效利用废弃的瓯柑果皮和搞清瓯柑药效的物质基础, 为瓯柑综合开发利用提供科学依据,我们对瓯柑果皮中总黄酮的提取条件及含量测定进行研究. 2实验部分 2.1仪器 UV一7502PC紫外可见分光光度计(上海欣茂仪器有限公司)~BSIIOS电子天平(北京赛多利斯 天平有限公司);KQ一250DE型医用数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司);回流装置. 2.2试剂 芦丁(中国药品生物制品检定所);其他试剂均为分析纯(上海试剂一厂);实验用水为二次蒸馏 水.’ 2.3样品 瓯柑于2005年3月购于温州茶山丁岙,由温州师范学院生物与环境科学系陈贤兴高级实验师 鉴定,取皮,晒干,粉碎.准确称取样品,以1:20(g:mI)固液比加入石油醚,回流1h进行脱色脱 脂处理,过滤,将滤渣中石油醚挥发干,备用. 温州市科技局科研基金项目.编号:Y2004A020 联系人?电话:(O577E—mail:yangxiaofengl965@yahoo.c0m.cn 2005届本科毕业生 作者简介:杨小/=~,(1966--).女.浙江省平阳县人,副教授,主要从事天然产物化学与生物电分析的研究工作 收稿日期:2006—03—16:接受日期:2006—04—10 第1l期杨小凤等:瓯柑果皮中总黄酮的提取及含量的删定 3结果与讨论 3.1最佳提取条件的选择 3.1.1提取方法的选择 准确称取处理过的样品4.0g,加入80mI70乙醇溶液,分别用回流提取,索氏提取,超声波 提取等方法提取1h,过滤,滤液定容至100.00mI,得供试品.再按3.2.6项操作,分别测定总黄酮 的含量.结果表明,超声波提取总黄酮含量最高,索氏提取总黄酮含量最低,且超声波提取设备简 易.易操作和便于控制.因此,本实验选择超声提取方法. 3.1.2提取溶剂的选择 分别用乙醇,甲醇,丙酮,水作提取溶剂,进行超声波提取,按3.1.1项操作得供试品并测定总 黄酮的含量.结果表明,甲醇提取效果最佳,乙醇次之,丙酮最差.综合考虑毒性和提取效率,本实 验选择乙醇作提取溶剂. 3.1.3提取温度的选择 用乙醇作提取溶剂,分别在30,40,50,60,70,80C等进行超声波提取,按3.1.1项操作得供试 品并测定总黄酮的含量,结果见图1.结果表明,温度在30—70C总黄酮含量随着温度的升高显着 增加,当温度大于70C时,总黄酮含量又下降,这是由于温度越高,分子运动越剧烈,渗透,扩散,溶 解速度加快,使黄酮类化合物容易转移到溶剂中.因此,随着温度的升高,总黄酮提取率越高;但温 度过高可能引起黄酮类化合物结构被氧化破坏导致总黄酮提取效率下降.故为了使总黄酮有较高 的提取效率,并且保证活性成分不被破坏,本实验选择60C作为提取温度. 3.1.4正交设计优化提取条件2j 按L.(3)正交设计 表对提取的4个因素和3 个水平进行试验,各因素 和水平见表1,分析结果 见表2.表2的分析结果 表明,影响超声波提取瓯 表1考察的因素及水平 柑果皮中总黄酮的主次因素为D—A—C—B(因RRR.R.),即提取次数,乙醇浓度,固液比,提取时 间.最佳的提取条件组合为.B.C.D.(据最大K值),即80乙醇在60’C下