2010年4月生物实验试题.doc

实验一：观察植物细胞的有丝分裂 1．实验原理。植物的分生组织(如根尖分生区、茎尖生长点等)细胞，能够通过有丝分裂增加其数目。依据植物细胞分裂周期中各个时期细胞中染色质或染色体的形态、数目、位置变化，确定该细胞所处的时期。为了看清染色体和染色质，要用碱性染料将其染色。 2．实验目的。 (1)初步掌握制作根尖细胞有丝分裂装片的技术。 (2)观察植物细胞有丝分裂的过程，识别分裂的不同时期。 (3)初步掌握绘制生物图的方法。 3．实验材料和用具。洋葱(大蒜也可)，质量分数为15％的盐酸，体积分数为95％的酒精溶液，质量浓度为O．01g／mL或0．02g／mL龙胆紫溶液(或醋酸洋红液)； 显微镜，载玻片，盖玻片，玻璃皿，剪刀，镊子，滴管。 4．评分标准。 (1)剪取根尖2-3mm，放入15％的盐酸和等量的95％的酒精溶液混合液中，在室温下解离3--5分钟。 (2)将酥软的根尖用清水漂洗约10分钟。 （1分） (3)0．01g／mL或O．02g／mL龙胆紫溶液染色3--5分钟。 (1分) (4)装片。将染色的根尖放在载玻片的清水中，加盖玻片和载玻片轻压。 (1分) (5)显微镜观察。 ①转动显微镜转换器，使用较大光圈对准通光孔，进行对光。 (1分） ②将制好的装片放在载物台上，用压片夹压紧装片的两端。 （1分） ③双眼从一侧注视低倍物镜，双手向前转动粗准焦螺旋，使镜筒缓慢下降直至接近装片为止。 (1分) ④左眼注视目镜(右眼睁开)，反方向转动粗准焦螺旋，使镜筒缓慢上升直至看清物像为止，用细准焦螺旋将物像调清晰，低倍镜下找到分生区细胞。 （1分） (6)将分生区细胞移至视野的中心，直接转换转换器，将低倍物镜移走，使高倍物镜对准通光}L，进一步用细准焦螺旋和反光镜将细胞调节清晰。高倍镜下找到处于分裂期的细胞，辨别出某个分裂期的细胞，举手示意。 (1分) (7)绘出有丝分裂中期图(含4个染色体)。 (1分) 5．实验整理。用纱布将载物台擦干净，使低倍镜恢复原位，将显微镜放回原处，将实验用具擦拭干净放回原处，摆放整齐，擦净桌面。 6．实验简析。 (1)培养洋葱生根时，避免用新采收的洋葱，因它尚在休眠不易生根。培养过程 中，注意每天至少换水一次，以防烂根。如果必须用当年刚采收的新洋葱培养生根，则应设法打破它的休眠。常用的方法是用低浓度的赤霉素溶液浸泡洋葱底盘，这样可以促 使其生根。选择底盘大的洋葱作生根材料。 如果是头年收下的洋葱，剥去外层老皮，用刀削去老根(从底盘中央向四周削)，注意不要削掉四周的“根芽”。 如果班级较多，为了防止后用的班级所需的洋葱根长得过长，也可以放入冰箱里(1-2C)培养。 (2)固定时间取材。洋葱根尖细胞有丝分裂的时间是有规律的。通常在每天上午10时至下午2时分裂活跃，尤其以上午11时30分时最活跃，可在这时取材。培养的根尖不宜过长，解离时切取的长度更不能超过3mm。 (3)解离充分是实验成功的关键。解离充分，压片时细胞才能分散开，细胞也不会重叠，才能制出单层细胞的装片。植物细胞之间有胞间层，利用解离液可以溶解胞间层，使原来紧密粘在一起的细胞相互分离。在解离时，细胞已被杀死，永久地处于细胞分裂周期中的某个时期的生活状态。 (4)漂洗的目的是洗去根尖中的酸，利于染色时碱性染料着色。 (5)染色可改在载玻片上进行，其步骤是：将根尖放在载玻片上，滴一滴染液染色3－5分钟，盖上盖玻片，用吸水纸吸去多余的染液。用龙胆紫染液染色时，染液浓度和时间必须掌握好。染色过深将导致镜下一片紫色，无法观察。 (6)压片时用力要恰当，用力过重过猛可能将组织压烂，压碎玻片等；过轻时，细胞未分散而相互重叠。二者都影响观察。压片时，最好在盖玻片上面放一张吸水纸，然后再在其上面加一块载玻片，再用拇指垂直向下压。这样可以防止上面的载玻片与盖玻片粘在一起。避免根尖细胞各区位置错动。压片的目的是使细胞分散成单层。压片时不可使载玻片移位。 (7)在用高倍镜观察时，先用低倍镜观察，再用高倍镜观察，要找根尖分生区的细胞观察。一个视野中一般不会同时有分裂各期的细胞。这时，可通过移动装片去寻找。 实验二：探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的水解作用 1．实验原理。麦芽糖、葡萄糖和果糖都是还原糖，还原糖都能与斐林试剂发生氧化反应，生成砖红色的氧化亚铜沉淀。 淀粉和蔗糖都不是还原糖，鉴定时不会产生砖红色氧化亚铜沉淀。在酶的作用下能够将淀粉分解成麦芽糖和葡萄糖，蔗糖水解成的葡萄糖和果糖麦芽