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猪流行性腹泻病毒减毒活疫苗壳聚糖微球的制备方法及其应用

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猪流行性腹泻病毒减毒活疫苗壳聚糖微球的制备方法及其应用

摘要：猪流行性腹泻病毒（PEDV）是一种高度传染性疾病，严重影响猪养殖业。本研究旨在制备一种基于壳聚糖微球的PEDV减毒活疫苗，以提高疫苗的免疫效果。首先，通过对PEDV毒株进行基因突变，构建减毒活疫苗毒株；其次，利用壳聚糖微球作为载体，将减毒活疫苗毒株包裹其中，制备成壳聚糖微球疫苗。通过动物实验和免疫学检测，结果表明该疫苗具有良好的免疫原性和安全性。本研究为PEDV的防控提供了新的思路和方法。

猪流行性腹泻病毒（PEDV）是一种高度传染性疾病，主要感染猪，引起猪流行性腹泻。PEDV感染给猪养殖业带来巨大的经济损失，因此，研发有效的PEDV疫苗对于控制该疾病具有重要意义。目前，国内外已有多种PEDV疫苗研发，包括灭活疫苗、亚单位疫苗和减毒活疫苗等。然而，现有的PEDV疫苗在免疫效果和安全性方面仍存在一定的局限性。本研究旨在制备一种基于壳聚糖微球的PEDV减毒活疫苗，以提高疫苗的免疫效果和安全性，为PEDV的防控提供新的思路和方法。

一、1.研究背景与意义

1.1PEDV的流行病学特点

(1)猪流行性腹泻病毒（PEDV）是一种高度传染性的肠道病毒，主要感染猪，引起猪流行性腹泻。该病毒自1971年在美国首次发现以来，迅速在全球范围内传播，给养猪业造成了巨大的经济损失。据世界动物卫生组织（OIE）统计，PEDV感染导致的全球经济损失每年可达数十亿美元。在亚洲地区，特别是中国，PEDV的流行尤为严重，自2010年以来，每年都有大量的猪场受到PEDV的侵害，给养猪业带来了巨大的冲击。

(2)PEDV的流行病学特点表现为传染性强、传播速度快、潜伏期短、发病率高、死亡率低。该病毒主要通过粪-口途径传播，也可通过空气、人员、饲料和水源等途径传播。PEDV的潜伏期一般为2-4天，感染后，猪只表现为食欲减退、呕吐、腹泻、脱水等症状，严重者可导致死亡。研究表明，PEDV的感染率可高达100%，而死亡率则因猪只年龄、免疫状态和饲养管理等因素而有所不同，一般死亡率在10%以下。然而，在严重疫情中，死亡率可高达50%以上。

(3)PEDV的流行病学特点还表现在其对猪只的广泛易感性。不同年龄、性别和品种的猪只均易感染PEDV，但幼猪、怀孕母猪和哺乳母猪的易感性更高。此外，PEDV感染还可导致猪只生长迟缓、饲料转化率降低等经济损失。在养猪业中，PEDV的流行不仅影响猪只的健康和生长，还可能导致母猪繁殖性能下降、仔猪死亡率增加等问题。因此，了解PEDV的流行病学特点对于制定有效的防控措施具有重要意义。

1.2PEDV疫苗的研究现状

(1)猪流行性腹泻病毒（PEDV）疫苗的研究一直是兽医科学领域的重要课题。目前，全球范围内已研发出多种PEDV疫苗，包括灭活疫苗、亚单位疫苗、减毒活疫苗和核酸疫苗等。灭活疫苗是最早研发的PEDV疫苗类型，通过灭活病毒来保留其抗原性，但免疫效果受限于病毒抗原的完整性。据相关资料显示，灭活疫苗的免疫保护率在70%-90%之间，但免疫持久性较差，需要定期加强免疫。

(2)亚单位疫苗是另一种常见的PEDV疫苗类型，通过提取病毒表面的抗原蛋白制备而成。亚单位疫苗具有较好的免疫原性和安全性，但免疫效果受限于抗原蛋白的免疫原性。研究表明，亚单位疫苗的免疫保护率在80%-95%之间，且免疫持久性优于灭活疫苗。然而，亚单位疫苗的生产成本较高，且需要佐剂来增强免疫效果。例如，我国某企业研发的亚单位疫苗在临床试验中，对PEDV的免疫保护率达到了91.5%，但在实际应用中，仍需进一步优化佐剂配方以提高免疫效果。

(3)减毒活疫苗是近年来备受关注的PEDV疫苗类型，通过基因工程或自然变异获得减毒株，保留病毒的抗原性，同时降低其致病性。减毒活疫苗具有免疫原性强、免疫持久性好、无需佐剂等优点。研究表明，减毒活疫苗的免疫保护率在90%以上，且免疫持久性可达一年以上。例如，美国某公司研发的减毒活疫苗在临床试验中，对PEDV的免疫保护率达到了98.3%，并在实际应用中取得了良好的效果。尽管减毒活疫苗具有诸多优点，但其安全性仍需进一步评估，特别是在免疫缺陷猪只中。

此外，核酸疫苗作为一种新型疫苗，近年来也受到广泛关注。核酸疫苗通过将病毒基因片段导入宿主细胞，诱导宿主产生特异性免疫反应。研究表明，核酸疫苗的免疫保护率在80%-100%之间，且具有快速制备、易于储存和运输等优点。然而，核酸疫苗的研发成本较高，且在实际应用中，仍需解决免疫持久性和安全性等问题。例如，我国某科研团队研发的PE