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诺如病毒微生物学培训

汇报人:刘老师

2023-11-29

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contents

诺如病毒概述

诺如病毒生物学特性

诺如病毒感染与致病机制

诺如病毒检测方法与技术

诺如病毒防控策略与治疗手段

实验操作安全与注意事项

01

诺如病毒概述

诺如病毒(Norovirus,NoV)是一组形态相似、抗原性略有不同的病毒颗粒,属于杯状病毒科(Caliciviridae)。

根据基因组结构和生物学特性,诺如病毒可分为多个基因型(Genogroup,GG),其中GGI、GGII和GGIV主要感染人类,导致急性胃肠炎。

分类

定义

1968年,美国诺瓦克镇一所小学暴发急性胃肠炎疫情,科学家从患者粪便中分离出一种病毒颗粒,命名为诺瓦克病毒(Norwalkvirus)。

1990年代,科学家发现诺瓦克病毒与其他形态相似的病毒颗粒具有共同的抗原性和基因组特征,将其归类为诺如病毒。

传染源

流行季节

潜伏期

临床表现

易感人群

传播途径

诺如病毒感染者为主要传染源,包括患者、隐性感染者和病毒携带者。

主要通过粪-口途径传播,如摄入被病毒污染的食物或水、接触被污染的物体表面等。此外,呕吐物产生的气溶胶也可导致传播。

人群普遍易感,尤其是幼儿园、学校、养老院等集体单位的人群。

全年均可发生感染,但寒冷季节(如秋冬季)发病率较高。

通常为24-48小时,最短12小时,最长72小时。

主要为恶心、呕吐、腹痛和腹泻等急性胃肠炎症状。部分患者可能伴有发热、头痛和肌痛等症状。病程通常较短,一般为2-3天。儿童患者以呕吐为主,成人患者腹泻较多见。

02

诺如病毒生物学特性

呈圆形或卵圆形,无包膜,表面有刺突。

病毒粒子形态

直径约为27-35nm,属于小型病毒。

病毒粒子大小

由核酸和蛋白质外壳组成,核酸为单股正链RNA。

病毒粒子组成

基因组结构

5端和3端分别有非编码区,其中5端非编码区含有与病毒复制相关的保守序列。

基因组大小

诺如病毒基因组大小约为7.5-7.7kb,由三个开放阅读框(ORF)组成。

基因编码蛋白

诺如病毒主要编码6个非结构蛋白和2个结构蛋白,其中结构蛋白VP1形成病毒粒子的外壳,具有抗原性。

复制周期

诺如病毒在宿主细胞内的复制周期包括吸附、穿入、脱壳、生物合成和装配释放等阶段。病毒粒子通过刺突吸附于宿主细胞表面,然后通过内吞作用进入细胞。在细胞内,病毒粒子脱去外壳,释放核酸,利用宿主细胞的原料和能量进行生物合成。最后,新合成的病毒粒子在宿主细胞内装配成熟,以出芽方式释放到细胞外。

要点一

要点二

生命周期

诺如病毒的生命周期相对较短,从感染到产生新的病毒粒子仅需数小时。这使得诺如病毒在环境中迅速传播和扩散,增加了防控的难度。同时,诺如病毒具有较强的变异能力,容易出现新的毒株,给疫情防控带来挑战。

03

诺如病毒感染与致病机制

主要通过粪-口途径传播,也可通过接触污染物体表面、气溶胶等方式传播。

感染途径

人-人传播为主要传播方式,食物和水也可成为传播媒介。

传播方式

受体

诺如病毒主要感染人类小肠上皮细胞,通过与细胞表面的受体结合而进入细胞。

细胞嗜性

诺如病毒具有广泛的细胞嗜性,可感染多种动物和人类细胞系,但主要侵犯小肠上皮细胞,引起肠道炎症。

致病过程

诺如病毒进入小肠上皮细胞后,通过复制和释放病毒颗粒,破坏细胞结构和功能,引起肠道炎症和腹泻等症状。

临床表现

诺如病毒感染后潜伏期较短,通常为12-48小时。主要症状包括恶心、呕吐、腹泻、腹痛等,部分患者可能出现发热、头痛、肌痛等全身症状。病程通常为自限性,持续数天至一周左右。重症患者可能出现脱水、电解质紊乱等并发症。

04

诺如病毒检测方法与技术

通过细胞培养,如人胚肾细胞、人胚肺细胞等,进行病毒分离。

病毒分离

电镜观察

血清学鉴定

利用电子显微镜观察病毒颗粒的形态、大小、结构等特征。

采用免疫荧光技术、酶联免疫吸附试验等方法进行血清学鉴定。

03

02

01

RT-PCR

反转录聚合酶链式反应,检测病毒核酸,具有灵敏度高、特异性强、操作简便等特点。

利用抗原与抗体的特异性结合反应,检测病毒抗原或抗体,具有操作简便、结果可靠等优点。

酶联免疫吸附试验(ELISA)

将胶体金标记的抗体与待检样品中的抗原结合,通过层析作用将复合物分离出来,实现对病毒的定性或半定量检测。

胶体金免疫层析法

05

诺如病毒防控策略与治疗手段

个人卫生习惯

饮食卫生管理

社交距离措施

通风与消毒

01

02

03

04

养成勤洗手、戴口罩等良好的个人卫生习惯,减少病毒传播风险。

加强食品和水源卫生管理,避免病毒通过食物和水源传播。

在公共场所保持适当社交距离,降低疫情传播风险。

保持室内通风,定期对公共场所和物品进行消毒,以消除病毒残留。

介绍诺如病毒疫苗的种类、原理及作用机制。

疫苗种类与原理

明确各类

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