南方红豆杉内生真菌Bionectria sp.的分离、鉴定及代谢产物活性研究.pdf

维普资讯 第 29卷第 6期 2007年 6月 VO．29 NO．6 Jun． 2007 文章编号 ：1673—9868(2007)O6～0131—05 0 H a S 南方红豆杉 内生真菌Bionectriasp． 西 卅 的分离、鉴定及代谢产物活性研究 南 恍 大 学 h 余 艳 ， 胡 昌华 学 垤 西南大学 药学院，现代生物医药研究所 ，重庆 400716 报 ( y 占 ( 摘要 ：从南方红豆杉树皮中分离到 3O株 内生真菌 ，结合形态学和 ITS-5．8SrDNA序列两种鉴定方法，确定其 中 1 然 № 株 (xH004)为生赤壳属 (Bionectria)真菌，这是 目前世界上首次从红豆杉科植物 中分离到该属 内生真菌．通过抑茵 科 学 实验、细胞毒实验、TLC检测和 HPCL检测证明XH004代谢产物具有明显的抗茵和杀细胞作用，且极可能含有紫 ) C 收 S 杉醇或 紫杉醇类似物． 关 键 词 ：南方红豆杉 ；内生真菌；生赤壳属 ；紫杉醇 中图分类号：QE93 文献标识码 ：A d 内生真菌是指那些在其生活史 中的某一段时期生活在植物组织内，对植物组织没有引起 明显病害症 状 的真菌 ，主要 由子囊菌及其无性型组成 ，也有少数担子菌和接合菌u ．内生真菌长期与植物共 同生 活 ，因此不少种类具有与宿主相同或相似的有用物质．开发利用重要经济植物体 内的内生真菌具有深远 的现实意义 ． 南方红豆杉 (Taxuschinensisvar．mairei)特产于 中国，是国家一级保护植物 ，也是红豆杉属中分布最 广的树种．由于南方红豆杉树皮中含有抗癌药物紫杉醇 ]，导致该树种被大量砍伐 ，自然资源遭到极大破 坏．为了获得可持续利用 的药物资源 ，人们将 目光转向南方红豆杉 内生真菌 ，发现了众多产紫杉醇及其他 有用代谢产物的菌株 ． 生赤壳属是 1999年Rossman等根据形态学及分子生物学特征将一部分丛赤壳科菌种独立出来建立的 生赤壳科中的一个属 ，被归类为生赤壳科 ，肉座菌 目，子囊菌纲 ，子囊菌门。由于是新定义的一个属 ，所 以国内外对它 的研究很少．本研究发现一株新 的南方红豆杉 内生真菌——B0ecfrnsp．(编号XH004)，并 以此为对象研究其代谢产物的活性． 1 材料与方法 1．1 材 料 南方红豆杉树皮采 自重庆市北碚区缙云山，采集地海拔约800m，树龄450a，胸径 1．3m，高约20m； HeLa细胞为谈锋教授赠送 ；白色假丝酵母 (Candidaalbicans)[CMCC(F)98001]、金黄色葡萄球菌 (S z0c0cc“saureus)[CMCC(B)26003]、枯草芽孢杆菌 (Bacillussubtilis)[CMCC(B)63501]、铜绿 假单孢菌(Pseudomonasaeruginosa)[CMCC10lo4]、大肠杆菌(Escherichiacoli)[CMCC(B)44103]为重 收稿 日期 ：2006—12—28 基金项 目：重庆市科技攻关资助项 目(2003—8110)． 作者简介：余 艳 (1980一)，女 ，重庆江津人 ，硕士研究生 ，主要从事功能基 因组与新药筛选的研究 通讯作者 ：胡昌华，教授．