mir-29b在慢性粒细胞白血病细胞增殖及凋亡中的作用及其机制研究的开题报告.docx

mir-29b在慢性粒细胞白血病细胞增殖及凋亡中的作用及其机制研究的开题报告

开题报告

题目：mir-29b在慢性粒细胞白血病细胞增殖及凋亡中的作用及其机制研究

一、研究背景和意义

慢性粒细胞白血病（chronicmyeloidleukemia，CML）是一种由成熟的骨髓干细胞向肝脾（hepatosplenomegaly）转移和异常增殖所引起的恶性血液病。CML主要是由染色体Ph+的比例异常引起的，该染色体中的bcr-abl基因的融合导致ABL-酪氨酸激酶的激活，进而促进细胞增殖和凋亡抵抗，从而导致CML细胞的异常增殖。CML是一种难以治愈的癌症，虽然伊马替尼作为一种靶向药物可以控制白细胞的数字，但是治愈的比例极低，临床问题仍然很严重。

在CML发病过程中，microRNA（miRNA）等非编码RNA基因参与了细胞增殖、凋亡、分化及肿瘤发生发展等生物学过程。miRNA是一类短链（~22nt）的非编码RNA，能够与靶mRNA特异性结合，起到下调mRNA的翻译和抑制其蛋白质细胞内水平的作用。其中，mir-29b是调节CML发展的非常重要的miRNA，它能够下调BCR-ABL的表达，抑制癌细胞的增殖和提高凋亡率，是一个非常有潜力的治疗CML的激素。

二、研究目的和内容

为了更深入了解mir-29b对CML细胞增殖和凋亡的作用及其机制，本研究的目的是：

1.确定mir-29b的表达水平在CML细胞中的变化。

2.研究mir-29b对CML细胞的增殖和凋亡的影响，并探索其作用机制。

三、研究方法

1.细胞培养和处理：采用人CML干细胞系K562、LAMA-84和KU812细胞系，在体外制备细胞悬液，使用外源性转染或使用mir-29b-mimic和-miR-NC-stable转染进行处理。

2.Real-timePCR检测mir-29b的表达：提取细胞总RNA，使用实时荧光定量PCR方法测定mir-29b的表达水平，并用U6RNA作为内部参照。

3.克隆体条形码：利用WST-1细胞增殖试剂盒、染色体形态学分析、流式细胞术分析细胞增长情况。

4.流式细胞术：使用双荧光素酶分子探针，检测miRNA对白细胞凋亡率的影响。

四、研究意义

通过本研究的探索，可以更清楚的了解mir-29b在CML细胞中的作用机制，对治疗CML的研究提供新的思路和策略。此外，本研究也可以为miRNAs与其他肿瘤关联研究提供新的视野和思路。