乐胃饮颗粒制备工艺的研究.doc

乐胃饮颗粒制备工艺的研究 　　[摘要] 目的 研究乐胃饮颗粒的水提醇沉制备工艺。 方法 以尿囊素、陈皮苷含量和浸膏得率为考察指标，通过L9（34）正交实验设计优选水提工艺条件，并单因素考察醇沉质量分数，以确定乐胃饮颗粒的最佳制备工艺。 结果 水提工艺影响因素依次为：提取时间（C）提取次数（D）加水量（B）浸泡时间（A），最佳水提工艺条件为A3B3C1D2，即处方药材加10倍量水、浸泡1.5 h、提取2次、提取时间为1 h。醇沉质量分数以75%为佳。 结论 该制备工艺合理，有效成分提取率高。 　　[关键词] 乐胃饮颗粒；正交设计；尿囊素；陈皮苷；高效液相色谱法 　　[中图分类号] R283 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701（2013）13-0094-03 　　乐胃饮颗粒由临床经验效方化裁而来，是以山药、薏苡仁、陈皮等中药组成的纯中药制剂，具有健脾益气、疏肝理气的功效，临床用于治疗肠易激综合征（IBS）、功能性消化不良（FD）等消化道疾病。然而，传统水煎方法不仅耗时，而且煎煮方法难以规范。因此，为了优化制备工艺，使之服用方便，并进行有效的质量控制，确保临床疗效，我们采用水提醇沉制备工艺，并用正交实验法和单因素考察方法对其进行了研究。 　　1 材料 　　日本岛津高效液相色谱仪；G02色谱工作站（绿绵安特分析系统装备公司）；尿囊素对照品（中国药品生物制品检定所，批号111501-200202）；陈皮苷对照品（中国药品生物制品检定所，批号110721-200613）；处方中所有药材均由浙江中医药大学第二门诊部提供，经鉴定符合中国药典2005年版一部标准；甲醇（色谱纯）；乙腈（色谱纯）；水（纯化水）；实验所用其他试剂为分析纯。 　　2 制备方法 　　取药材山药60 g、薏苡仁60 g、陈皮30 g，将1/4山药粉碎成细粉（6号筛）备用，其余药材加水提取2次，第1次加10倍量水，浸泡90 min，提取60 min，第2次加8倍量水提取30 min，合并两次煎液，过滤，滤液减压浓缩至0.8 g/mL的清膏。取清膏，搅拌加入95%的乙醇，使乙醇最终浓度为75%，静置48 h，取上清液，滤过，滤液减压回收乙醇并浓缩至相对密度为1.35（70～80℃）的稠膏，按等量递加法加入山药粉末，混匀、制粒、过筛，70℃干燥，分装即得。 　　3 制备工艺 　　3.1 水提工艺条件 　　3.1.1 正交实验设计 为了符合中医汤剂的特点，保持处方中水溶性成分的有效性，本实验在制备工艺上采取水提醇沉法。考虑到浸泡时间（A）、加水量（B）、提取时间（C）、提取次数（D）是与提取效果相关的主要因素，因此，水提工艺的考察对象是以上4因素，以尿囊素、陈皮苷含量和浸膏得率为评价指标得出综合评分，按L9（34）正交实验设计优选乐胃饮颗粒最佳水提工艺条件。因素水平见表1。 　　3.1.2 浸膏得率的测定 用L9（34）正交表安排试验，称取2倍处方量药材90 g，按设定方案进行煎煮、滤过、浓缩，定容至100 mL。精密吸取20 mL，放置到蒸发皿中（已干燥至恒重），水浴挥干，并在105℃烘箱内干燥3 h，置干燥器中冷却0.5 h，迅速称重W，按下式计算浸膏得率，结果见表4。 　　浸膏得率（%）=■×100% 　　3.1.3 尿囊素含量的测定 ①色谱条件 色谱：HypersilBDS C18，4.6 mm×250 mm；流动相：甲醇-氯仿-水（0.2：0.012：100）；流速：0.6 mL/min；柱温：30℃；检测波长：224 nm；进样量：20 μL；检测灵敏度为0.01AUFS。①对照品溶液的制备 取尿囊素对照品，精密称取5 mg，放置于5 mL量瓶中，加热水（50℃）溶解并稀释至刻度，制成1.0 mg/mL的溶液，备用。③标准曲线的制作 精密取对照品储备液适量，加重蒸水稀释成（0.2、0.1、0.05、0.025、0.0125）mg/mL的溶液。精密吸取上述对照品溶液20 μL进样，按上述色谱条件测定，以尿囊素峰面积（Y）为纵坐标，进样量（X）为横坐标，进行线性回归，得回归方程：Y = 395.95 X+89.331，相关系数r = 0.9995，结果表明，尿囊素在0.25～4 μg范围内呈良好线性关系。④供试品溶液的制备 精密取样品溶液10 mL，精密加入10 mL甲醇，超声30 min，离心15 min（4000 r/min），取上清液，浓缩至干，用重蒸水溶解并定容至10 mL量瓶中，用0.45 μm微孔滤膜滤过，即得。⑤阴性样品溶液的制备 按处方比例及供试品溶液制备方法配制缺山药的阴性样品溶液。分别精密量取对照品溶液、供试品溶液、阴性样品溶液各20 μL注入液相色谱仪，按上述色谱条件测定峰面积，根据上述回归方程计算尿囊