浙江省地方标准《食品安全地方标准 水产品中4-己基间苯二酚残留量的测定 高效液相色谱法》（征求意见稿）.doc

ICS FORMTEXT 点击此处添加ICS号 FORMTEXT 点击此处添加中国标准文献分类号 FORMTEXT DB FORMTEXT 33 FORMTEXT 浙江省地方标准 DB FORMTEXT 33/ FORMTEXT — FORMTEXT XXXX FORMTEXT FORMTEXT 食品安全地方标准 水产品中4-己基间苯二酚残留量的测定 高效液相色谱法 FORMTEXT FORMTEXT FORMDROPDOWN FORMTEXT FORMTEXT 201X - FORMTEXT XX - FORMTEXT XX发布 FORMTEXT 201X - FORMTEXT XX - FORMTEXT XX实施 FORMTEXT 浙江省卫生厅发布 DB33/ —XXXX PAGE \* MERGEFORMAT 4 前言 本标准按照GB/T 1.1-2009《标准化工作导则 第1部分：标准的结构和编写》的规则起草。 本标准的附录A为资料性附录。 本部分由浙江省卫生厅提出并归口。 本标准起草单位：舟山市渔业检验检测中心，浙江省海洋开发研究院 本标准主要起草人：郝云彬、罗海忠、罗海军、陈璐、吴益春、杨会成、祝世军 本标准首次发布。 水产品中4-己基间苯二酚残留量的测定高效液相色谱法 范围 本标准规定了虾、蟹类水产品中4-己基间苯二酚（4-HR）残留量的高效液相色谱测定方法。 本标准适用于虾、蟹类水产品中4-己基间苯二酚的测定。 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 原理 用乙腈和二氯甲烷混合提取水产品中4-己基间苯二酚，提取液过氨基固相萃取柱净化，浓缩，残渣用流动相溶解，液相色谱-荧光检测器检测，外标法定量。 试剂和材料 除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T 6682规定的一级水。 乙腈：色谱纯。 二氯甲烷。 甲醇。 丙酮。 正己烷。 乙腈水溶液：准确量取60 mL乙腈和40 mL水，混匀后备用。 甲醇丙酮溶液：准确量取50 mL甲醇和50 mL丙酮，混匀后备用。 乙腈二氯甲烷溶液：准确量取70 mL乙腈和30 mL二氯甲烷，混匀后备用。 4-己基间苯二酚标准品：CAS136-77-6，纯度大于99.0%。 4-己基间苯二酚标准储备液：准确称取100 mg（精确到0.1 mg）的4-己基间苯二酚标准品于100 mL容量瓶中，用乙腈水溶液（4.6）溶解并定容至刻度，配制成浓度为1 mg/mL标准储备液，于4℃避光保存。 氨基固相萃取柱：500 mg，3 mL，或相当者。使用前用6 mL甲醇丙酮溶液（4.7）和6mL正己烷活化。 微孔滤膜：0.45 μm，有机相。 氮气：纯度大于等于99.99%。 仪器 高效液相色谱仪：配荧光检测器。 天平：感量0.01 g。 分析天平：感量0.000 1 g。 离心机：最大转速10 000r/min。 旋涡混合器。 旋转蒸发仪。 固相萃取装置。 氮气吹干仪。 高速组织捣碎机。 操作方法 样品处理 虾去头、去壳、去附肢，取可食肌肉部分。 蟹等取可食肌肉部分。.样品切为不大于0.5 cm×0.5 cm×0.5 cm的小块后混匀。密闭包装放置冰箱中--18 ℃冷冻贮存备用。 提取 称取5 g（准确到0.01 g）样品置于50 mL离心管中，加入10 mL乙腈二氯甲烷溶液（4.8），高速组织捣碎机匀浆2 min，盖塞，旋涡混匀1 min，超声提取10 min，8500 r/min离心5 min，取上清液转入100 mL旋转蒸发瓶中，重复上述操作一次。合并提取液于45℃下旋发至近干，取7.5 mL二氯甲烷分三次超声溶解。 净化 将6.1.2中的待净化液转移至固相萃取柱（4.11）中。依次用6 mL正己烷淋洗，吹近干，6mL甲醇丙酮溶液（4.7）洗脱。整个固相萃取过程流速不超过1 mL/min。洗脱液于50℃下用氮气吹干，残留物用1 mL流动相溶解，过微孔滤膜（4.12），供液相色谱测定。 样品测定 色谱条件 色谱柱：C18柱（150 mm ×4.6mm，5μm）；或相当者。 流动相：乙腈+水（6+4，体积比），混匀。 流速：1 mL/min。 柱温：35℃。 激发波长：280 nm。 发射波长：310 nm。 进样量：10 μL。 标准工作曲线的制作 准确取4-己基间苯二酚标准储备液（4.10），用流动相稀释成为0.01 μg/mL、0.05 μg/mL、0.50 μg/mL、1.0 μg/mL、2.0 μg/mL、5.0 μg/mL系列标准工作液，供