三角褐指藻乳酸脱氢酶的原核生物表达与纯化技术.docx

三角褐指藻乳酸脱氢酶的原核生物表达与纯化技术

目录

三角褐指藻乳酸脱氢酶的原核生物表达与纯化技术（1）．．．．．．．．．．4

内容描述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4

1.1研究背景．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4

1.2研究目的与意义．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．5

1.3国内外研究现状．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．6

三角褐指藻乳酸脱氢酶概述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．7

2.1LDH的结构与功能．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．8

2.2LDH在生物体内的作用．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．8

2.3LDH的应用前景．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．9

原核生物表达系统选择．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．10

3.1常见原核生物表达系统．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．10

3.2表达系统选择依据．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．11

3.3优化表达条件．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．12

三角褐指藻LDH基因的克隆与表达．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．13

4.1基因克隆．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．13

4.2表达载体的构建．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．14

4.3表达载体的转化与筛选．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．14

4.4表达产物的鉴定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．15

三角褐指藻LDH的纯化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．16

5.1纯化方法概述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．17

5.2离心分离．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．18

5.3吸附层析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．19

5.4离子交换层析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．20

5.5高效液相色谱纯化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．20

三角褐指藻LDH的活性测定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．21

6.1活性测定方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．22

6.2活性分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．23

6.3活性影响因素．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．24

三角褐指藻LDH的应用研究．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．25

7.1生物催化应用．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．26

7.2生物制药应用．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．27

7.3其他潜在应用．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．27

三角褐指藻乳酸脱氢酶的原核生物表达与纯化技术（2）．．．．．．．．．28

内容描述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．28

1.1研究背景与意义．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．29

1.2研究内容与目标．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．30

1.3文献综述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．31

三角褐指藻乳酸脱氢酶的分子生物学基础．．．．．．．．．．．