人枯否细胞在同种肝移植免疫中作用机制初步探讨.pdf

·520· 实验研究 人枯否细胞在同种肝移植免疫中 作用机制初步探讨 张长习 谢文彪 林绪涛 张帆 管清海 陈强谱 【摘要】 目的 探讨肝脏枯否细胞(KC)在肝移植后早期免疫反应中的可能作用。方法将KC 和(或)异体PBMc共培养，收集细胞上清液。培养结束时分别收获培养的KC和PBMc。检测HLA_ G在细胞表面的表达；测定上清液中N()、IFN一7、IL-10和TGF一既的浓度；MTT试验观察KC对淋巴 细胞增殖的影响。结果 实验组及对照组中KC和PBMC表面均未检测到HLA-G的表达。与不含 KC实验组相比。含KC实验组中，N0、lL-10和TGF．既的产量显著升高，而IFN一7呈相对偏低趋势； 对照组中未能检测到lL_10和lFN一7的分泌，仅含Kc的对照组中含少量N0及TGF-p，，且显著低于 实验组。MTT实验发现，不含KC实验组oD值显著高于含KC实验组及对照组。结论体外KC 接触异体PBMC后早期，各细胞膜表面均无HLA-G表达，但参与了No及Thz／Th3样细胞因子的 分泌调节，并能抑制淋巴细胞增殖反应，可能促进肝脏移植早期免疫耐受的形成。 【关键词】肝移植； 枯否细胞； 淋巴细胞混合培养； 一氧化氮； 细胞因子； 免疫耐受 RoJeandmech彻j锄ofhuman cdlsinIjver Kupffer a¨o-geneictrampJantati仰ZHANGCh口卵旷工i‘， X“一￡no。ZHANG XJEⅥ■n一6妇o，LJN Fn挖，GUANQi理g一^ni，CHENQ妇ng一户“．。DP户口以mPn￡D， Bin名^o“MPdicnz HP户口￡D6iZi口ryS“rgP，≯，f^已H05户i￡口ZA．，丫iZi口￡ed￡D C(，ZZPgP，Bi九z．ilo甜256603， P．R．C^inn To the roleandmechanismofthe cells(KCs)in 【Abst豫ct】Objectiveexploreposs．ble Kupffer liver atthe MethodsInvitroceUcontactcoculturewas allo．geneictransplantationearlystage． system werecoIlected onthe daftercocul— estabIished．Culturesupernatants respectively1st，2nd，4th，6th tureand andPBMCswereharvestedonthe6th after ofHI。A—G theKCs cuIture．The day expression onthemembraneoftheKCsandPBMCswasdetectedwith Nitratereductiontest immunochemistry． wasusedtodeterIIlinetheconcentrationofnitric levelsinthe oxide．1FN一丫，IL一10，TGF—B1cytokine werealsomeasuredwithELISA．The of wasevaluatedwith supernatants proliferationlymphocytes Six HLA—Gmoleculesweredetectedonthe oftheKCsand MTT．R船u-tsd