人促红细胞生成素基因在家蚕体中的高效表达.pdf

卷 期 生 物 工 程 学 报 ! ! %’(!)(! 年 月 #$$$ ! !#$%%’()*$+,( .#(/%0$(,( *+,-+. #$$$ - 12 / !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 人促红细胞生成素基因在家蚕体中的高效表达 ， !# ! # ! 张传溪 姜育蕾 胡 萃 吴祥甫 ! （中国科学院上海生物化学研究所 上海 ） #$$$3! # （浙江大学应用昆虫学研究所 杭州 ） 3!$$#0 摘 要 人促红细胞生成素（ ）是一种调控红系干细胞增殖、分化和成熟的糖蛋白激素。将合成的 456 456 78)9 插入杆状病毒转移载体 ，使其置于 基因强启动子控制之下，获得了转移载体 。将 ;’-;+7 ;’-;+7456 : ! 5= : ;’-;+74568)9与野生型;)5%8)9共转染;)细胞，经空斑纯化，获插入456 78)9 的重组病毒.;)2 : 。经 杂交和 扩增鉴定证明人 基因已正确组建于 的预定位置。将重组病毒 5%456 ?,@=., 5AB 456 ;)5% 穿刺接种 龄幼虫和蛹，收集感染第 的幼虫血淋巴和 蛹血淋巴。用 检测幼虫 .;)5%456 C 3CD 3ECD 4FG?9 血淋巴中 表达量高达 ／ ，蛹血淋巴中表达量达 ／ 。 结果显示幼虫血淋巴和蛹 456 #1$$-F HI$$$-F JK@.,L’@ 血淋巴均有一条明显的免疫杂交带，分子量均约为 。用 细胞对幼虫表达产物进行了生物活性测定，每 #M8 NO2! 毫升血淋巴中 活性约为 。 456 3$$$- 关键词 人促红细胞生长素基因，家蚕核型多角体病毒，昆虫细胞，蚕体，基因表达 中图分类号 文献标识码 文章编号 （ ） NP0# 9 !$$$23$!#$$$$!2$$I2$C 促红细胞生成素（ 简称 ）是 内稳定性较差，降解较快，从而在体内活性较低的问 4.@=.Q@Q