猪圆环病毒2型感染PK-15细胞差异蛋白质组研究的开题报告.docx

猪圆环病毒2型感染PK-15细胞差异蛋白质组研究的开题报告 摘要： 本研究旨在探究猪圆环病毒2型（Porcine Circovirus Type 2, PCV2）感染PK-15细胞时的差异蛋白质组变化。通过液相色谱串联质谱技术（LC-MS/MS）对PCV2感染PK-15细胞和对照组细胞的蛋白质组进行分析，以期发现与PCV2感染有关的不同ially表达的蛋白质，从而深入了解PCV2感染的分子机制。 本研究拟采用以下步骤进行： 第一步，筛选并培养正常的PK-15细胞，并进行PCV2感染处理。 第二步，利用蛋白质提取试剂盒提取细胞蛋白质，以蛋白质浓度为标准进行等量混合处理。 第三步，利用SDS方法进行蛋白质分离，以及梯度聚丙烯酰胺凝胶电泳(radioactive gradient polyacrylamide gel electrophoresis, DIGE)方法对蛋白质标记分析。 第四步，对分离出的蛋白质进行酶切，得到肽段，通过液相色谱串联质谱技术（LC-MS/MS）的手段进行肽段的鉴定与定量。 第五步，对鉴定出差异ially表达的蛋白质进行生物信息学分析，包括KEGG通路、物种特异性GO分析，分析差异ially表达蛋白质与PCV2感染的关系。 本研究的预期结果是确定与PCV2感染有关的不同ially表达的蛋白质，进一步阐述PCV2感染的分子机制，探索有效的防治与治疗措施。 关键词：猪圆环病毒2型；PK-15细胞；液相色谱串联质谱技术；差异蛋白质组