重组人内皮抑素（endostatin）腺病毒对卵巢肿瘤生长，转移抑制的实验分析.pdf

中文摘要 i n)腺病毒对 重组人内皮抑素(endostat 卵巢肿瘤生长，转移抑制的实验研究 研 究 生：赵 敏 指导教师：彭芝兰 教授 指导小组成员：赵 霞 教授 目的：在妇科恶性肿瘤中，卵巢癌的死亡率占据第一位，它的持续 生长具有血管依赖性，新生血管为不断增生的肿瘤细胞提供必要的营养 和转移通道。没有新生血管的生成，肿瘤将发生退化，一旦新生的血管 进入肿瘤组织，肿瘤则加速生长。肿瘤血管缺乏周细胞，基底膜不完整， 肿瘤细胞借助肿瘤血管离开原发部位进入血循环，易发生浸润和转移。 并证明即使在卵巢癌的早期促血管生成因子例如VEGF的表达量与疾病 的预后也有很大的关系。本研究探讨抗血管治疗能否抑制卵巢癌的生长。 Endostatin为胶原xⅧc末端的裂解片段，被认为是目前最有效的内源性 血管抑制物之一。本实验利用重组的人内皮抑素(endostatin)腺病毒于 裸鼠卵巢癌模型局部注射以探讨其抗肿瘤血管进而抑制肿瘤生长和转移 的抗血管基因治疗的可行性。材料和方法：利用已构建的重组人内皮抑 素腺病毒，在体外分别感染SK—OV3、A549、LL／2、等肿瘤细胞株，观 察重组蛋白表达情况及其感染上清液对培养的脐内皮细胞的抑制效应： 建立裸鼠sK．OV3卵巢癌模型中，接种SK—OV3细胞7天后肿瘤体积达 Ad—hEndo(重组病毒)、Ad—i3U1l(空 50一7()咖3，分别予瘤内注射l×i09pfu 病毒)及PBS(磷酸盐缓冲液)，7天后重复一次，一共两次，观察肿瘤 生长抑制效应和毒副反应，检测血清内皮抑素的表达情况并进行肿瘤组 织免疫组化分析肿瘤血管密度和凋亡情况。结果；不同感染复数的 Ad—hEndo感染肿瘤细胞均表达重组人内皮抑索蛋白，并随感染复数的增 上清液倍半稀释后对脐血管内皮细胞的增殖抑制率分别为68．8％， 57．9％，50％，43．2％，30．7％，18．9箱，7．78％，随着倍半稀释倍数的增加，对脐 血管内皮细胞增殖的抑制作用减弱，对照组的抑制率无明显变化 (pO．001)。动物实验中内皮抑素治疗组肿瘤体积明显小于对照组(空 ％(治疗组：空病毒组)(p0．05)，且无裸鼠的体重减少，出血等毒副 作用。治疗组外周血中内皮抑素的表达在注射第3天血清表达量最高， 达74．48174ng／ml，在第7天降为第3天表达量的一半左右 38．79878ng／ml，两周后仍高于对照组(p0．001)。在免疫组化分析中， 有对照组的l／3。细胞凋亡明显高于对照组(TUNED，AI为15．43-I-1．09， 几为对照组的5倍(pO．05)。结论：以腺病毒为载体的肿瘤局部血管基 因治疗能抑制卵巢癌新生血管形成进而有效抑制肿瘤生长和转移，且无 明显毒副反应。 关键词：卵巢癌，内皮抑素，腺病毒，抗血管基因治疗 Abstract InhibitionofOvariancancerGrowthand MetastasisViaLocal AdministrationofReconbinant EndostatinAdenovirus Graduate：ZhaoMin Zhilan Superviser：ProfPeng Zhao Members《B妇e穗。戢Prof．Xia canceris the causeof Purpose：Ovarian leading fatality anmng gy