术前甲状腺微小癌BRAF基因突变检测筛选高危患者的开题报告.docx

术前甲状腺微小癌BRAF基因突变检测筛选高危患者的开题报告

一、研究背景

甲状腺微小癌（PTMC）是指甲状腺癌中直径小于1cm的一种类型，近年来发病率明显增加。虽然PTMC预后相对良好，但是却存在一定的高危因素，如临近血管、淋巴管浸润等，这些因素会影响患者的预后和治疗方案。BRAF基因突变是PTMC中常见的一种分子遗传变异，已被证实与PTMC的发生和转移相关。因此，将BRAF基因突变检测应用于PTMC的高危患者筛选中，有望为临床中的治疗和预后评估提供有力的分子生物学依据。

二、研究目的

本研究旨在探讨采用BRAF基因突变检测对术前PTMC高危患者进行筛选的可行性和有效性，并对BRAF基因突变与PTMC的转移和预后进行分析，为临床治疗方案制定和预后评估提供基础数据。

三、研究内容和方法

研究内容：

1.分析PTMC高危患者的临床病理资料，如病理类型、大小、分化程度、淋巴结转移等。

2.采用PCR扩增法对患者的甲状腺组织样本进行BRAF基因突变检测，确定BRAF基因突变与患者的临床病理特征之间的相关性。

3.通过追踪患者的随访情况，分析BRAF基因突变与PTMC转移和预后之间的关系。

研究方法：

1.研究对象：收集350例术前诊断为PTMC的患者。

2.组织标本采集及处理：收集患者手术获取的甲状腺组织标本，制备成石蜡切片并染色。

3.PCR扩增反应：采用实时荧光PCR扩增技术，引物和探针设计为检测BRAF基因V600E点突变。PCR反应体系：10μL2×TaqMan试剂，1μLDNA、1μL引物和探针混合液，剩余加水。PCR反应条件：95℃预变性2min；95℃变性15s，62℃联合35s，最终延伸72℃30s，共进行40个循环。

4.结果分析：统计检测结果，分析BRAF基因突变与患者的临床病理特征和预后之间的相关性。

四、研究意义

本项研究对于利用分子生物学方法在术前对PTMC高危患者进行筛选具有重要的意义。在筛选出高危患者后，能够及时制定个性化治疗方案，提高患者的治疗效果和生存率。同时，对于深入了解BRAF基因突变与PTMC的预后、转移等方面的关系也有着重要的临床价值，为制定更加准确的预后评估和治疗方案提供科学依据。