药对桂枝――羌活挥发油成分研究.doc

药对桂枝――羌活挥发油成分研究摘 要：目的：分析药对桂枝-羌活、单味药桂枝和羌活的挥发油成分。方法：采用气相色谱-质谱（GC-MS）检测。通过化学计量学解析法对二维色谱/质谱数据进行解析，从而实现对药对桂枝-羌活、单味药桂枝和羌活的挥发油成分的分析。结果：药对桂枝-羌活、单味药桂枝和羌活分辨出的色谱峰，通过质谱库对其进行定性，分别得到45、35和36个定性结果，占总含量的96.34%、95.76%和93.94%。结论：药对挥发油成分主要来自于单味药羌活，而化学成分种类基本上为2个单味药的加和。? 关键词：药对桂枝-羌活；挥发油；气相色谱-质谱；化学计量学解析法? 中图分类号：R284.1文献标识码：A文章编号：1673-2197（2008）07-015-03?? 配伍理论是中药复方的核心问题。药对是中医临床上常用的、相对固定的两个单味药的配伍形式，是复方的最小组成单位。分析药对中两药配伍后发生的化学变化和物理作用，可以阐明复方中药物的配伍机理，剖析和理解复方，使之更好的应用于临床。? 桂枝-羌活为常用解表药对［1］。桂枝散寒解表、温经通脉、通阳化气；羌活辛能发散、温能祛寒、苦能燥湿，既能发表散寒，又能除湿止痛［2］。二药伍用，辛温发散，同气相求，共奏通阳散寒解表之功。挥发油是解表药对的有效成分［3］，药对桂枝-羌活的挥发油成分尚未见报道。本文采用GC/MS法分离检测药对桂枝-羌活、单味药桂枝和羌活的挥发油成分，利用化学计量学解析法（?Chemometrics resolution method?，CRM）［4~8］对重叠峰进行分辨，再凭质谱库对分辨的纯组分进行定性，用总体积积分法进行定量，并比较了单味药与药对的挥发油成分，讨论了单味药配伍后挥发油成分的变化。? 1 材料与方法? 1.1 仪器与药品? 仪器为QP2010型气相色谱仪―质谱仪（日本岛津公司）。药材桂枝和羌活均购自湖南中医药研究院，经该院中药研究所鉴定，分别为樟科植物肉桂(?Cinnamomum cassia Presl?)的干燥嫩枝?伞形科植物羌活(?Notopterygium incisum Ting ex H.T.Chang?)的干燥根茎及根。? 1.2 挥发油的提取? 药对挥发油的提取：称取干燥的桂枝（?Ramulus cinnamomi?，RC）和羌活（?Rhizoma seu radix notopterygii?，RsRN）各50g，置于1000 mL圆底烧瓶中，加水至700 mL。参照中国药典2000年版挥发油提取法提取［9］。? 单味药挥发油的提取：分别称取干燥的桂枝和羌活各50g，按照以上方法提取。? 1.3 挥发油的测定条件? 色谱条件：色谱柱OV-1(30m×0.25mm)。程序升温：起始温度40℃，以2℃/min升至130℃，保持5min，再以10℃/min升至230℃，维持15min。载气：He，流速1?0mL/min进口温度250℃，界面温度280℃。? 质谱条件：电子EI源，能量70eV。离子源温度：230℃。倍增电压：1.28KV。扫描范围40~600amu，扫描速率：3?8scans/s。溶剂延迟2min。? 1.4 数据分析? 数据分析在PentiumШ850（Intel）计算机上进行，程序用Metlab6.1编写，所分辨的质谱在NIST标准质谱库中检索。? 2 结果与讨论? 2.1 挥发油成分的定性分析? 图1为药对桂枝-羌活和桂枝?羌活的挥发油成分GC/MS检测的总离子图（TIC），其中部分色谱峰产生重叠。以图1(a)中的峰簇A（保留时间为50.6~51.2min，放大为图2）为例说明CRM的应用。? 由图2可见，峰簇A由两个色谱峰组成，但每个色谱峰都不平滑。若直接从色谱库中进行检索，峰簇A中左边的色谱峰是?isoaromadendrene epoxide?，其相似度为75%；右边部分是?epiglobulol?，其相似度为74%。该峰簇左半部分与右半部分的不同位置检索结果均不相同，且相似度都较低，这说明峰簇A是一个重叠峰。这种重叠峰直接从色谱库中进行检索的定性结果，其可靠程度和准确度都较低，也难以进行定量分析。? 利用CRM分析，结果表明峰簇A是一个三组分体系（图3）。根据各组分的纯色谱曲线和质谱，再将它们与NIST标准库进行匹配，可检索到三种化合物1、2和3，分别为nerolidyl acetate、1-hydroxy-1、7-dimethyl-4-isopropyl-2、7-cyclodecadiene和spathulenol、相似度分别为93?61%、95.1%和97.35%，相对含量分别为0.21