抗缩胆囊素卵黄抗体的制备及应用研究的开题报告.docx
抗缩胆囊素卵黄抗体的制备及应用研究的开题报告
题目:抗缩胆囊素卵黄抗体的制备及应用研究
一、研究背景
胆汁酸是胆汁中的主要成分之一,它能够帮助消化脂肪和吸收脂溶性维生素等营养物质。而缩胆囊素则是胆汁酸的代谢产物。缩胆囊素的水平在体内的变化与肝功能和胆道系统有关,因此缩胆囊素的测定对于检测肝胆疾病具有重要意义。目前,常用的缩胆囊素测定方法包括高效液相色谱法和放射性同位素法等。这些方法存在一些局限,比如需要复杂的仪器设备、操作复杂等。
因此,研究一种简便快捷、灵敏度高、特异性强的测定缩胆囊素的方法具有重要的研究意义和应用前景。抗缩胆囊素卵黄抗体就是一种新型的缩胆囊素测定方法。
二、研究目的
(1)制备抗缩胆囊素卵黄抗体;
(2)对制备的抗缩胆囊素卵黄抗体进行鉴定,并测试其灵敏度、特异性、重现性等性质;
(3)建立抗缩胆囊素卵黄抗体的免疫测定方法,研究该方法在人体血清和胆汁样品中的应用价值。
三、研究内容
(1)制备抗缩胆囊素卵黄抗体
采用多肽合成技术合成缩胆囊素多肽,并将其连接到卵黄蛋白上,制备成抗原。将该抗原用于兔子免疫,获得抗缩胆囊素卵黄抗体。
(2)抗体鉴定
采用酶联免疫吸附试验,对制备的抗缩胆囊素卵黄抗体进行鉴定,并测试其灵敏度、特异性、重现性等性质。
(3)建立免疫测定方法
采用建立的免疫测定方法,测定一组人体血清和胆汁样品中的缩胆囊素水平,并与传统的测定方法进行对比分析,评估该方法的应用价值。
四、研究意义
(1)开发一种快速、灵敏、特异的缩胆囊素测定方法;
(2)为临床诊断和药物研发提供重要的实验工具;
(3)推动我国抗体制备技术向高水平前进。
五、研究方法与技术路线
1、多肽合成技术
2、抗原提取与纯化技术
3、兔子免疫技术
4、酶联免疫吸附试验
5、免疫测定方法的建立
技术路线如下:
(1)缩胆囊素多肽合成
(2)缩胆囊素多肽与卵黄蛋白连接
(3)抗原纯化与提取
(4)兔子免疫
(5)抗体鉴定
(6)测定缩胆囊素水平
(7)数据分析与比较
六、预期结果
(1)成功制备抗缩胆囊素卵黄抗体;
(2)建立一种快速、灵敏、特异的缩胆囊素测定方法;
(3)应用该方法测定人体血清和胆汁样品中的缩胆囊素水平,获得一组实验数据,并进行分析和比较。