SNT 1151.6-2004 对虾白斑病毒斑点杂交和原位杂交检测操作规程.pdf
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2017-11-01 发布
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点膜：
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变性：1N NaOH 30分钟
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原位杂交仪的操作方法与步骤.doc
原位杂交仪的操作方法与步骤
《原位杂交仪的操作方法与步骤》
原位杂交仪是一种在分子生物学研究中非常重要的仪器，正确操作它对于实验结果的准确性至关重要。下面我将详细介绍其操作方法与步骤。
一、实验前准备
1.样本处理
-首先要获取合适的样本，样本的质量直接关系到杂交结果。对于细胞样本，需要将细胞培养到合适的密度。就像种庄稼，得等作物长到合适的阶段才能收割一样。如果细胞太稀，可能检测信号就会很弱。对于组织样本，要进行固定、切片等处理。这就好比是给食材做前期处理，切得大小、薄厚合适才能更好地烹饪。固定是为了保持细胞或组织的形态结构，就像把花朵夹在书本里做成干花来保持它的形状一样。
2.试剂准备
-准
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原位杂交双语.ppt
In situ hybridization desigen by Eric wang 一、概念 应用已知碱基序列并带有标记物的核酸探针与组织、细胞中待检测的核酸按碱基配对的原则进行特异性结合而形成杂交体，然后再应用与标记物相应的检测系统，通过组织化学或免疫组织化学方法在被检测的核酸原位形成带颜色的杂交信号，在显微镜或电子显微镜下进行细胞内定位。 IN SITU HYBRIDIZATION is an imaging method to visualize mRNA expression in tissues and cell
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第1章 共用程序
引 言：
本章介绍了本实验最基本的实验程序，包括中期染色体制片；质粒的转化与DNA的提取；探针标记检测以及基因组总DNA的提取
第1节 原生质体染色体制片
试 剂：
饱和a-溴萘、0.075MKCl、固定液（新鲜3：1甲醇冰乙酸）、酶解液（20%纤维+2%果胶酶）、IN HCl、95%酒精
实验步骤：
浸 种 室温下浸种约一天（也可1-2h）
发 芽 培养皿中垫湿滤纸三层，利子分散其上，间留间隔，勿堆积，种子上层覆盖一层水浸湿的滤纸，25-30℃下发芽，每天水洗一两次，约2-3天可取根。
NOTE：换水是很重要的，水不能过多，以不留流动水为好，水分
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(19)中华人民共和国国家知识产权局
(12)实用新型专利
(10)授权公告号 CN 213102265 U
(45)授权公告日 2021.05.04
(21)申请号 202120675510.4
(22)申请日 2021.04.02
(73)专利权人 山东畜牧兽医职业学院
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收 费 代 码 收费名称 FISH检测项目 收费标准 标 本 要 求 报告时间 E976 病理切片肿瘤基因原位杂交检测-荧光法（FISH） Her-2基因扩增检测 1900元 新鲜组织、石蜡包埋组织、白片、胸腹水 白片须用涂胶防脱片，组织切片 厚度4~5μm 自接到标本或申请单之日起3个工作日 EGFR基因拷贝数检测 ALK-EML4融合基因检测 ALK基因断裂检测 C-Met基因扩增检测 PTEN基因缺失检测 TopoⅡα基因异常检测 神经母细胞瘤N-myc
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前言近年来，以表皮生长;材料标本来源：广州医科;主要试剂与仪器蛋白酶;检测方法（1）FISH检测：;检测方法（2）IHC检测：3;结果判断（1）FISH结果判;结果判断（2）IHC结果判定：;统计学处理采用SPSS17;结果FISH图1.EGFR;结果IHC++++++-;结果FISH技术与IHC法检;讨论表皮生长因子受体;讨论FISH技术检测的;讨论以FISH为标准，IHC与;讨论表2.2963例乳腺癌H;讨论综上所述，免疫组化;参考文献[1]Reiter