第十章 抗生素类药物的分析.ppt

第十章　抗生素类药物的分析The Analysis of Aantibiotic drugs;第一节　概　　　述;1、抗生素类药物一般检查项目： ①鉴别试验: 用化学法、物理化学法以 及生物学法来确认是哪种抗生素 ②毒性试验: 控制药品中的毒性物质 ③无菌试验: 检查药品中有无杂菌污染 ④热源试验: 控制药品中的致热物质 ; ⑤水分测定: 控制水分含量 ⑥溶液澄明度检查: 检查不溶性物质 ⑦?溶液pH试验: 测定pH ⑧降压试验: 检查有降压作用的杂质 ⑨?? 效价测定: 有效成分测定; 生物学法 物理化学法;(1)???? 生物学测定法 以抗生素抑制细菌生长能力或杀菌能力作为衡量效价标准;(2)???? 物理化学测定法 根据抗生素化学结构利用其特有的化学或物理化学性质及反应进行。; 缺点: 对于结构相似的抗生素，测定结果往往只能代表总的含量，并不一定能代表某一抗生素的生物效价，只有当用物理化学法测定结果与用生物学法测定效价相一致时，才能用于效价测定。 ;3、本章内容 ＊ ?-内酰胺类: 青霉素类头孢菌素类 ＊氨基糖苷类: 链霉素　庆大霉素 ＊四环素类:;第二节　?-内酰胺类抗生素的分析; ＊青霉素类: 母核: 由?-内酰胺环和氢化噻唑环 组成的双杂环。 6-APA 6-Aminopenicillanic Acid 侧链 : RCO-　　 ;苄青霉素（青霉素G） ;②? 头孢菌素类结构 ;2、性质 青霉素类和头孢菌素类结构共同特点具有?-内酰胺环。 ①?? 酸性 ＊有羧基，具有酸性 ＊pKa值在2.5~2.8之间 ＊与碱成盐 如：青霉素G钠、青霉素G钾等;②? 旋光性 有手性碳原子，具有旋光性;③? 紫外吸收 ＊ 青霉素类母核没有共轭系统，没有紫外吸收 ＊ 但青霉素类药物在弱酸性下水解，可以产生具有共轭双键的青霉烯酸，在紫外光区有吸收。 ＊ 侧链中有苯环等取代基的药物，在紫外光区也有吸收。像苄青霉素。 ;头孢菌素类分子中有共轭体系 （O＝C－N－C＝C） 在260nm处有最大吸收。;④? ?-内酰胺环的不稳定性 干燥、纯净青霉素类抗生素稳定，其水溶液很不稳定. 不稳定的部分是?-内酰胺??? ?-内酰胺环在酸、碱、青霉素酶、某些金属离子的作用下，可使?-内酰胺环开环或发生分子重排，而失去抗菌作用。;ⅰ;ⅲ ;二、鉴别试验 ; 2、青霉素的各种盐的鉴别 3、硫酸及硫酸-甲醛反应 4、硫酸-变色酸反应 5、紫外分光光度法及红外分光光度法 ; 三、含量测定;;①?? 方法 (ⅰ) 水解前：将样品溶液的pH调至8;以“青霉素钠”为例 ChP 90; ③?? 讨论 (ⅰ) 溶剂 新沸过且用0.01M NaOH液中和的水 目的：消除水中酸性物质影响（如CO2） (ⅱ) 滴定前中和 消除能消耗碱的杂质影响（如一些酯 类杂质）;(ⅲ) 空白试验目的: 在加热水解过程中，有可能会吸收CO2，对测定有影响，所以要做空白试验校正。 (ⅳ) 本法供试品用量较大，多用于效价高的供试品的测定 ;2、碘量法;理论上:1mol青霉素≈8mol I原子 实际上: 1mol青霉素≈8~9mol I原子 ※温度，放置时间，pH，浓度，碘过量程度， 杂质多少等影响因素。;②方法： 以“青霉素钠”为例，ChP 二部;（2）空白试验：; ③ 讨论： （1）溶液的pH值在4.5左右 （2）温度：24~26℃ （3）放置时间：15~20′;（4）空白试验：做法与一般空白不同（加样品,不加碱水解,其他操作同样品） ＊目的：消除样品中预先存在的降解产物（青霉噻唑酸）及其他耗碘杂质的影响 （5）灵敏度高：因为1:8，所以供试液浓度在 10~100μg/ml即可测定 ;3、汞量法; 青霉素分子中的氢化噻唑环含有一个硫原子，开环后形成巯基（—SH），可用汞量法测定 ;4、可见—紫外分光光度法 ① 原理： 青霉素在弱酸性下（pH=4），不完 全水解，产生青酶烯酸，在320—360nm 处有强吸收。 青霉烯酸在酸性溶液中极不稳定，有 两种改进方法。 ;（1）铜盐法（JP13）： 铜离子与青酶烯酸形成稳定的螯合物，在320nm处有最大吸收。 对照品法定量。 用于氨苄青