载药肿瘤囊泡通过激活核DNA感受器诱导巨噬细胞产生IFN-β及其机制研究.pdf

华中科技大学硕士学位论文

中文摘要

背景：干扰素（Interferon，IFN）是一类受基因调控、涉及RNA和蛋白质合成、具

有广谱抗病毒活性的蛋白质，可分为IFN-I（IFN-α、IFN-β、IFN-ε、IFN-κ和IFN-

ω）、IFN-II（IFN-γ）和IFN-III（IFN-λ）。IFN-I不仅参与抵抗病毒入侵，在肿瘤免

疫中也发挥重要作用，但由于缺乏有效的IFN-I激活剂，使其在临床应用中效果不

佳。肿瘤囊泡是肿瘤细胞受到刺激信号后释放的一种直径在100～1000nm间的亚细

胞结构，是一种良好的药物载体。本课题组在前期研究中发现，利用肿瘤囊泡负载

化疗药物制备的“载药肿瘤囊泡”可以通过激活p38-NF-κB信号通路诱导肿瘤微环境

中M2型巨噬细胞向M1型转换，重塑M2型肿瘤相关巨噬细胞表型，同时还可通过

促进巨噬细胞分泌IFN-β增强抗肿瘤反应，但载药肿瘤囊泡诱导巨噬细胞分泌IFN-

β的具体机制还不清楚。本研究通过制备负载甲氨蝶呤、多柔比星、顺铂等肿瘤化

疗药物的载药肿瘤囊泡（MTX-MP、Dox-MP、Cis-MP），对其促进巨噬细胞分泌

IFN-β的机制进行深入探究。

目的：探究载药肿瘤囊泡诱导巨噬细胞分泌IFN-β的分子机制。

方法：1.检测接受载药肿瘤囊泡治疗前后肺癌患者胸腔积液中IFN-β含量；2.利用

小鼠肝癌细胞系H22构建小鼠肝癌腹水模型，通过腹腔注射载药肿瘤囊泡，评估其

治疗后腹腔IFN-β水平；3.培养小鼠骨髓细胞，通过体外诱导为M2型巨噬细胞，

经载药肿瘤囊泡处理后，检测其IFN-β分泌水平，并利用多种分子生物学实验，对

分子机制进行深入探究。

结果：1.载药肿瘤囊泡诱导M2型巨噬细胞分泌IFN-β增强其抗肿瘤功能；2.载药

肿瘤囊泡激活溶酶体P450单加氧酶（CytochromeP450monooxygenase，CYPs）上

调溶酶体pH值；3.溶酶体向细胞核运动，激活细胞核DNA感受器-cGAS-STING信

号通路，从而诱导巨噬细胞产生IFN-β；4.载药肿瘤囊泡协同抗PD-1抗体，治疗小

鼠恶性腹水。

关键词：IFN-β；载药肿瘤囊泡；细胞核DNA感受器；cGAS-STING信号通路；溶

酶体

V

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Abstract*

Background:Interferon(IFN)isatypeofprotein,involvedinRNAandproteinsynthesis

andhasbroad-spectrumantiviralactivity.IFNcanbeclassifiedasIFN-I(IFN-α、IFN-β、

IFN-ε、IFN-κAndIFN-ω)、IFN-II(IFN-γ)andIFN-III(IFN-λ).Withthedeepeningof

research,ithasbeenfoundthatinadditiontocombatingvirusinvasion,IFN-Ialsoplays

animportantroleintumourimmunity.However,theirclinicalapplicationcouldbemore

effectiveduetothelackofeffectiveIFN-Iactivators.Tumourmicroparticles,which

diameterarebetween100and1000nm,arereleasedbytumourcellsafterreceiving

stimulationsignals.Inourpreviousresearch,wefoundthatdrug-loadedmicroparticles

pr