化学合成+microRNA-21+inhibitors+对大鼠心肌成纤维细胞活化增殖的影响.pdf
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安徽医科大学学报 Acta Universitatis MedicinalisAnhui 2015 May;50(5) ·577 ·
化学合成microRNA-21 inhibitors对大鼠心肌
成纤维细胞活化增殖的影响
1,2 1,2 1,2 1,2 1,2 1,2 1,2
张 猛 ,陶 辉 ,陈泽文 ,张家贵 ,宣海洋 ,占红英 ,石开虎
摘要 目的 探究 microRNA-21 inhibitors对大鼠心肌成纤 21进行了大量研究,但 CFs 中microRNA-21的确切
TM
维细胞活化增殖的影响。 方法 应用 Lipofectamine 2000 作用机制尚不完全清楚。 该实验以体外培养的CFs
Reagent 向大鼠心肌成纤维细胞瞬时转染 microRNA-21 in- 为研究对象,通过观察 microRNA-21 inhibitors转染
hibitors24、48 h后,实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR) 后CFs的增殖影响、I 型胶原前胶原 A1(collagen
检测microRNA-21、I型胶原前胶原A1(Col1A1)和α-平滑肌
type I alpha 1,Col1A1)及CFs表型转换为肌成纤维
肌动蛋白(α-SMA)的表达水平;Western blot法检测 Col1A1
细胞的标志性蛋白α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth
和α-SMA 的表达水平;MTT 法检测 microRNA-21 inhibitors
对心肌成纤维细胞活化增殖的影响。 结果 转染 microR- muscle actin,α-SMA)的表达变化,为心肌纤维化、心
NA-21inhibitors的心肌成纤维细胞中,microRNA-21表达下 脏重构提供新的参考依据。
调,Col1A1和α-SMA 的表达下降;转染microRNA-21 inhibi-
1 材料与方法
tors的心肌成纤维细胞增殖活性明显减弱。 结论 microR-
NA-21inhibitors可明显抑制心肌成纤维细胞增殖活性,提示 1.1 材料
microRNA-21是心肌成纤维细胞活化增殖的潜在靶向分子, 1.1.1 实验动物 雄性 SD 乳鼠30 只,出生 1~3
有利于为干预和预防心肌纤维化的发生发展提供新思路。 d,8 ~9 g,清洁级,购于安徽医科大学实验动物中
关键词 microRNA-21;心肌成纤维细胞;Col1A1;α-平滑肌 心。
肌动蛋白
1.1.2 主要试剂 DMEM培养基、胰蛋白酶、MTT
中图分类号 R542.23
相关试剂(Sigma 公司,美国);胎牛血清(Gibco 公
文献标志码 A 文章编号 1000-1492(2015)05-0577-05
TM
司,英国);Lipofectamine 2000 Reagent、TRIzol 试
心肌纤维化是指心肌细胞外基质中胶原纤维过 剂(Invitrogen 公司,美国);microRNA-21 inhibitors、
量积聚、胶原含量显著升高或胶原成分发生改变的 EzOmics miRNA qPCR Detection Primer 试剂盒、
病理过程,是心肌重构的一个重要特
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