冬虫夏草菌丝体与天然冬虫夏草蛋白成分的分析比较.pdf

药物生物技术 304 PhⅫutical Bid№}m0】o科2003，10(5)：304～307 冬虫夏草菌丝体与天然冬虫夏草蛋白成分的分析比较 石继红1，党化宁2，万一1，包春杰1 (1．第四军医大学生物技术中心，陕西西安710032；2．西安华誉有限公司，陕西西安710061) 摘要利用液体培养基对冬虫夏草菌丝体进行培养，在18～20℃160r，IIlin摇瓶中培养72h，可得到266 异，啪湿菌体，并对天然冬虫夏草和冬虫夏草菌丝体的蛋白粗提液进行了蛋白含量，黔PAGE和眦分析。结 中低分子蛋白标准的回归方程为y=5．01847一1．11588x，其相关系数r=．o9913l，由此推算出天然冬虫夏草与冬 特有的蛋白质亚基的相对分子质量为17142及小于12372的多肽，其余的蛋白质亚基稍有差异，在天然冬虫夏草 蛋白经唧Jc分析，可以分离出不同的蛋白峰，冬虫夏草菌丝体所含蛋白质较天然冬虫夏草简单且分离效果好。 关键词冬虫夏草；蛋白质；sI摊聚丙烯凝胶电泳；高效液相色谱 中图分类号：硝17 文献标识码：A 文章编号：1005—8915(2003)05—03悼04 冬虫夏草[cbr函∞挈rsi，琊括(肪庙．)岛cc]为麦 1材料和方法 角菌科真菌侵染蝠蛾属(胁p缸协)多种幼虫后形成 的菌虫复合体，是我国传统名贵中药…。其性平， 1．1材料 味甘，人肺肾经，具补肺益肾，止咳化痰之功效。 s讥∽括)产地为青海， 天然冬虫夏草(c。西唧s 可用于治疗阳痿遗精，腰膝酸痛，久嗽虚喘，老咳痰 购于北京大地现代农业有限股份公司，由西安华誉 血，病后体虚或自汗畏寒等症。现研究表明冬虫夏 有限公司鉴定惠赐；冬虫夏草菌丝体菌种由陕西省 草能增强人体免疫力，可用于治疗慢性肾炎，急性 肾功能衰竭，慢性支气管炎，肿瘤，高血脂和心律失 购于中国药品生物制品检定所；低分子蛋白Marker ext№t为 常等多种疾病’2j。 由上海东风试剂厂制备；嘶ptolle和Yeast 人工培养的冬虫夏草菌丝体与天然冬虫夏草 英国ox耐d公司产品；色谱柱1sK．cEL 的化学成分和药理作用相似”J。现代药理和临床 (7．5mm×300 研究主要集中在腺苷虫草素以及甘露醇等方面， 剂均为国产分析纯。 i 对此已有《卫生部部颁药品标准》进行了标准化，而 l．2方法 有关蛋白质的研究工作相对较少，很多具有生物活 1．2．1冬虫夏草茵丝体的获取以冬虫夏草菌丝 性的蛋白质可以在实验动物或人体中发挥重要的 体为菌种，用蛋白胨，酵母提取物和葡萄糖为主要原 m衄2斜面琼 调节作用，分离纯化冬虫夏草中的活性蛋白质成 料的培养基经分装灭菌后应用。取O．5 份，以期找到～些新的具有临床应用价值的蛋白质 或多肽，已经成为研究的一个重要方向。文章应用 20)℃160 L岬法，sDs．PAcE以及Ⅲ哩￡分析了天然和人接种于300词培养基的三角瓶中，同样条件下培养 工冬虫夏草的蛋白质的成分含量及分子质量分布， (60～72)h，4000r，耐n离心20西n收集发酵菌丝体， pH 为冬虫夏草