植物组织培养第十二章1马铃薯的组织培养.ppt

第十二章(1)马铃薯的组织培养陈传红制作2007/5本章内容提要与要求:★掌握马铃薯的生物学习性★掌握马铃薯脱毒培养的大致过程★了解马铃薯脱毒苗的鉴定方法★熟悉微型薯的生产过程马铃薯生物学特性形态特性根：根系由出生根和匍匐根两部分组成。茎：地上部分茎和地下茎，地下茎分匍匐茎和块茎。叶：初生叶，全缘，心形；后期叶奇数、羽状全裂单叶花：单生，为聚伞花序果实：为球形或椭圆形浆果。种子：小，扁平肾形；可用来繁殖，但后代性状分离大。2、生物学习性陈传红制作2007/5原产于拉丁美洲，为全球性的重要经济作物之一，适应性广，营养价值高，耐贮藏适运输。1马铃薯性喜冷气候，不耐高温和霜冻，解除休眠的块茎4℃下发芽，发芽适温为12～18℃。2块茎形成要求昼温14~24℃，夜温12～14℃，土温16～18℃。3结薯期要求12h左右的短日照和疏松、湿润、肥沃以及通气良好的土壤条件。4现象与问题：陈传红制作2007/5STEP4STEP3STEP2STEP1马铃薯生产中普遍存在有种性退化问题，表现为植株长势衰弱，株形矮化，分枝变少，薯块变小，产量逐降低，造成品种退化。经检测证明这是由于病毒引起的退化现象。危害马铃薯的病毒有17种之多，如X病毒、S病毒、Y病毒、M病毒、A病毒、花叶病毒、纺锤形块茎病毒等。由于多年的无性繁殖，病毒逐代积累，日益严重，引起严重退化。马铃薯病毒可使块茎产量减少50%~80%。解决办法：法国Morel和他的同事们，1955年从患病马铃薯植株中选取到了无病植株——马铃薯脱毒技术，为治疗作物病毒开辟了新途径。二、马铃薯脱毒技术陈传红制作2007/5马铃薯在营养繁殖时易受病毒的浸染，当条件适合时，病毒就会在植株内增殖，转运和积累，随着世代传递，病毒危害逐年加重。通过微茎尖组织培养技术能从马铃薯体内脱除PLRV、PVY、PVA、PAF、PVG、PVM、PSW等病毒，得到一定良种繁殖体系，生产优质种薯，是保证马铃薯高产、稳产的一项有效措施——马铃薯脱毒技术。我国已有许多科研、推广单位开展了研究生产，已形成了脱毒草种薯生产体系。1.马铃薯脱毒技术市场前景:陈传红制作2007/51我国单产为13.60吨/公顷，是世界单产的1/4。最主要因素是种薯差，品种布局不合理。2全国现有播种面积300多万公顷，且有逐步增加趋势，年需合格种薯45亿公斤，脱毒原种4亿公斤，脱毒小薯或微型薯45亿粒。因此，脱毒马铃薯推广具有广阔的市场前景。3采用脱毒快繁技术，种用脱毒种薯，一般可增产30-50%，甚至成倍增产，提高马铃薯生产能力。如果我国现有马铃薯播种面积的1/3用脱毒种薯，就可年增产粮食100多亿公斤。2.脱毒种薯生产程序：陈传红制作2007/5采用微茎尖组织培养的方法，诱导出苗，采用联免疫吸附试验法或指示植物方法鉴定马铃薯病毒和类病毒，经鉴定后，无主要病毒及类病毒的试管苗可定为脱毒试管基础苗。试管苗采用固体、液体培养基相结合的方法，进行扩繁基础苗，在防虫网室栽植或封闭温室扦插，生产出原原种（或称脱毒小薯）。用原原种在一定隔离条件下产生原种1代，以后逐级称为原种2代、良种1代、良种2代。（1）初代培养3．茎尖培养脱毒陈传红制作2007/5预处理：多采用在室内发芽，芽经热处理（38℃）2周。01表面消毒：取顶芽或侧芽茎尖（1cm）02自来水下冲洗70％的酒精浸润（15-20s）032％次氯酸钠溶液浸泡（4～5min）04无菌水冲洗3次。05培养条件：21～25℃、2000～3000lx、12h/d。生长情况:2～3周愈伤，4-5周绿点，3～6月长成2～3厘米小芽，越慢越好，出芽很快的扔掉。接种：把消毒好的芽放在解剖镜下仔细剥离，逐层剥去幼叶，露出圆滑的生长点，可以留1-2个叶原基，0.2—0.3毫米，随即接种于培养基中。培养基：MS＋NAA0.1＋GA30.2＋BA0.5＋2%蔗糖（液体，pH5.8）★培养基：MS+NAA0.2～0.5+D-泛酸钙10+3%蔗糖★培养条件：20-25度，3000-4000LX，14-16小时光照，每3周继代一次，单芽