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DNA指纹的遗传分析.doc

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【?实验结果】 1 电泳结果图: 图1:电泳结果图 说明:a.条带1-6是marker的条带。 b.条带7-9是基因D1S80的条带。 2 marker的标准曲线的制作: marker1标准带的相关曲线 条带 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 基因长度/bp 1031 900 80 0 700 600 500 400 300 250 200 150 100 Lg/bp 3.0133 2.9542 2.9031 2.8451 2.7782 2.6990 2.6021 2.4771 2.3979 2.3010 2.1761 2 迁移距离/cm 1.92 2.02 2.14 2.25 2.35 2.51 2.68 2.85 2.98 3.10 3.22 3.38 图4:marker 1的标准曲线 根据图4算出marker 2的相关数据: marker 2的相关数据 条带 1’ 2’ 3’ 4’ 5’ 6’ 迁移距离/cm 1.41 1.64 1.98 2.26 2.67 3.07 Lg/bp 3.39145 3.23975 3.01551 2.83083 2.56042 2.2966 基因长度/bp 2462.918 1736.800 1026 677 363 197 所以可以估算出条带1’~6’的标准分子量大概为2400、1700、1000、700、400、200。 将这一组数据应用到实验结果中marker标准曲线的绘制上,显然会给实验结果带来很大的影响。但又不可避免。 marker标准条带的相关数据 条带 1 2 3 4 5 6 基因长度/bp 2400 1700 1000 700 400 200 lg/bp 3.3802 3.2304 3.0000 2.8451 2.6021 2.3010 迁移距离/cm 1.22 1.41 1.69 1.95 2.28 2.64 图2 marker的标准曲线 3成员A、C、D的D1S80的计算: 根据marker的标准曲线知 表2: 图1中编号ACD的相关数据 条带 A(7) C(8) D(9) 迁移距离/cm 2.22 2.27 2.32 lg/bp 2.62818 2.59086 2.55354 基因长度 425 390 358 4结果记录表: 表3: 结果记录表 D1S80 DNA指纹特征 小组成员 大小/bp 长度(重复数) 杂合/ 纯合 A 425 18 纯合 B ----- ----- ----- C 390 15 纯合 D 358 13 纯合 E ----- ----- ----- F ----- ----- ----- 【实验分析及讨论】 A从图1可知小组成员里只有A、C、D有正常的条带,而且全是纯合体,而B、E、F并没有出现正确的条带,分析可能原因:a在取样时取得太少了,致使提取的DNA浓度过低,在该实验的PCR条件下30个循环不能得到正确的DNA分子拷贝。b取样不合适,可能在去口腔上皮时并没有在适合的位置取,导致取出来的并不是口腔上皮。c在操作过程中一些错误的步骤导致没有提出正确的DNA分子。 B图1中最下面的有一排亮亮的条带。据分析是PCR体系里引物的条带。但是我们可以发现与B、E、F相比,A、C、D对应的条带最亮最宽,说明引物的含量较多,但是偏偏 A、C、D有正确的条带。这似乎说不通,但是进一步的分析可以推测有以下两种原因:a在向Pcr小管里加入体系时,由于移液枪不准造成的加入体系不同,但这种概率较小。b在向胶孔加入样品时由于加入量不同造成的结果。这个显然比第一种出现的概率要大得多。 C原理中我们指出人类1号染色体上的VNTR D1S80,核心序列由16个核苷酸组成,拷贝数在14~41个之间,已知29种不同的等位基因。但是我们的实验结果里D的拷贝数为13,却小于14,由于两者比较接近所以将D的拷贝数应该认为是14,而出现这种偏差的原因可能在于:a marker标准的分子量我们是用的周五晚上组的图估算出来的(如图3),并不是说明书上标准的,所以marker的标准曲线与实际的可能有一定的差距,这样就会导致最后的结果也会有一定的差距。b在photoshop CS3软件测量距离时,并没有专业的分析距离的功能,而是利用相关功能读出来的,所以这可能会给结果带来很大的偏差。 D如果一个个体的两个D1S80等位基因之间相差一个重复,不可以用琼脂糖凝胶电泳检测。原因是在实验中我们用到的缓冲液是1*TAE,1.5%的琼脂糖。根据相关
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