反义寡聚脱氧核糖核苷酸对猪促卵泡刺激素受体表达的影响.doc

反义寡聚脱氧核糖核苷酸对猪促卵泡刺激素受体表达的影响 第 6 卷 第 3 期 Vol . 6 No . 3 中 华 男 科 学 2000 年 9 月 Sep . 2000 National Journal of Andrology ?论著? 反义寡聚脱氧核糖核苷酸 Ξ 对猪促卵泡刺激素受体表达的影响 朱长虹 , 熊忠明 , 肖慧珠 () 同济医科大学计划生育研究所 ,武汉 430030 () ( ) 摘要 : 目的 :本研究旨在评价反义寡聚脱氧核糖核苷酸 ODN对促卵泡刺激素受体 FSHRmRNA 表达的调节作 用 。 方法 :转染 FSHR 的 CHO 细胞系的 mRNA 水平用反转录2竞争性 PCR 方法进行定量测定 。 结果 :结果显示 μμ用 10mol/ L 反义 ODN 可 导 致 mRNA 表 达 显 著 上 升 , 24h 后 mRNA 水 平 从 0189 ?0106pg/g 总 RNA 升 至 1164 ? μμμ( ) 0108pg/g 总 RNA P 0105。用 0133mol/ L 反义 ODN 进行脂转染也得到相同结果 ,mRNA 水平从 0195 ?0108pg/g μ总 RNA 升高至 1153 ?0107pg/g 总 RNA 。这可能是由于 FSHR 蛋白翻译被抑制后上行调节 mRNA 合成所致 ,无义 ODN 对 FSHR mRNA 的表达没有任何作用 。 结论 :本文结果提示针对猪 FSHR 翻译起始位点的反义 ODN 能上行 调节猪 FSHR mRNA 的表达水平 。 关键词 : 促卵泡刺激素受体 ; 竞争性 PCR ; 反义寡聚脱氧核糖核苷酸 () 中图分类号 : Q523 文献标识码 : A 文章编号 : 100823839 20000320146204 Effect of Antisense Oligodeoxynucleotide on Expression of Porcine F2osltliicmleulating HorRmecoenpe t1o r Chang2Hong ZHU , Zhong2Ming XIONG , Hui2Zhu XIAO ( )Family Planning Research Institute , Tongji Medical University , Wuhan 430030 , China Abstract : Objectives : To assess the role of antisense oligodeoxynucleotide in regulating expression of FSHR gene1 Met hods : Porcine fol2 licle2stimulating hormone receptor messenger ribonucleic acid was determined by reverse transcription2competitive polymerase chain reaction1 μμRes ults : The results showed that direct culture with 10mol/ L antisense ODN caused a paradoxical increase of mRNA from 0189 ?0106 pg/ μμ( ) g total RNA to 1164 ?0108 pg/g total RNA P 01051 Transfection with lipofectamine and 0133 mol/ L antisense ODN caused an in2 μμcrease of mRNA from 0195 ?0108 pg/g total RNA to 1153 ?0107pg/g total RNA1 This was probably due to upregulation of mRNA synthesis resulting from inhibition of porcine FSHR protein translation1 The nonsense ODN had no effect on porcine FSHR mRNA1 Concl usions : These results indicate that an antisense ODN corresponding to the region of the translation start site of the porcine FSHR cDNA can upregulate the expression of p