血叶兰显微结构分析和性状描述.doc

血叶兰显微结构分析和性状描述 　　摘要：采用生药学方法，用FAA固定法、石蜡切片法及番红-固绿双重染色法对血叶兰进行显微结构分析及性状描述。结果表明，血叶兰根茎有18个纤维管束，排成间断的环形，每个环间距不等；叶、花、根茎、粉末均有草酸钙砂晶体；叶片横切面表皮细胞较大，且下表皮细胞大于上表皮细胞，有环式气孔，有副卫细胞2～3环，每环有3个细胞。 　　关键词：血叶兰；显微结构；生物学指标；根茎横断面；鉴定依据 　　中图分类号：S567.201文献标志码：A 文章编号：1002-1302（2014）11-0275-03 　　血叶兰别称石蚕、真金草、石上莲，为兰科血叶兰属植物，血叶兰以全草入药，全年可采，洗净鲜用或晒干，性味甘，是民间传统的中草药，有滋阴润肺、清热凉血之功效，可用于治疗肺结核咯血、神经衰弱、食欲不振等症[1-4]。血叶兰生于水边阴湿处的石面上，分布在广东省、江西省、湖南省、四川省、贵州省、浙江省等地[5-6]。目前有关血叶兰显微结构及性状分析研究尚未见报道。本研究采用生药学方法，对血叶兰进行显微结构鉴别及性状分析，旨在为开发血叶兰相关产品提供理论依据[7-8]。 　　1材料与方法 　　1.1材料与试剂 　　血叶兰由广州健民医药连锁有限公司提供，经广东省中药研究所鉴定为血叶兰属。福尔马林、乙醇、醋酸、二甲苯、石蜡（均为分析纯）均来自广州化学试剂厂。 　　1.2仪器与设备 　　恒温箱（广州仪器分析厂），RM-2155型石蜡切片机（江西仪器玻璃厂），XYH-4A光学显微镜（上海光学仪器厂）。 　　1.3方法 　　1.3.1样品处理工艺流程[9] 　　取材→固定→脱水处理→透明处理→透蜡→包埋→染色。取材：选用新鲜药材，切成长约50mm的小段。固定：将药材放入到FAA固定液中浸泡固定24h以上。脱水处理：将固定的药材依次放入体积分数为70%、85%、95%、100%的乙醇溶液中浸泡1、2、2、3h。透明处理：将上述药材放入等量的纯乙醇与二甲苯混合液中浸泡2h，再转入二甲苯溶液中浸泡2h。透蜡处理：将已透明处理的材料与二甲苯溶液一起倒入用于包埋的小烧杯中，将熔解的石蜡轻轻倒入烧杯。当石蜡在小烧杯上层凝固4～5cm时，将小烧杯放入35～37℃恒温箱中熔蜡，让石蜡缓慢熔解并渗透到二甲苯当中。包埋处理：将烧杯移到50～60℃恒温箱内（高于石蜡熔点），石蜡熔化后，倒去含有二甲苯的石蜡，加入纯石蜡。每隔1h换1次纯石蜡，共换3次，倒入纸盒定型，冷却。采用番红-固绿染色法[10-11]染色。注意事项：选取新鲜并具有代表性的药材，切成小段，迅速放入固定液中。尽量从低浓度乙醇开始脱水处理，否则极易发生细胞脱水。透蜡与包埋处理时，随时用针将材料展开。 　　1.3.2性状研究前处理取适量新鲜血叶兰，放入恒温箱中干燥，对血叶兰的叶片、花、根等进行研究[12]。 　　2结果与分析 　　2.1显微结构 　　2.1.1血叶兰叶片结构 　　血叶兰花瓣涂片厚度约为0.9mm，由图1、图2可知，血叶兰叶子上下表面细胞呈多边形，四周壁平直，细胞排列致密。叶片上表皮无气孔，气孔主要分布在下表皮，以环形结构为主。副卫细胞有2个环，每个环有3～4个细胞，副卫细胞由内到外逐渐增多增大。血叶兰叶面两侧都有淡褐色绒毛，下表皮分布最多，由多细胞构成，外形类似泡沫[13]。 　　血叶兰花瓣涂片厚度约1.2mm，由图3、图4可知，上下表皮细胞外围都有角质层，细胞以类方型为主，长轴直径较大；下表皮细胞数量远远多于上表皮，上下表皮细胞的内侧均有椭圆形的小细胞，内含草酸钙砂晶体；下表皮细胞有多个气孔，且下表皮内侧有厚角组织，1～3层左右。栅栏细胞外形类似短柱，排列无规则，通过主脉。相近的海绵细胞个体较大，多为短圆形，个体散在，排列疏松。两类细胞内含有淀粉小颗粒，均未见脐点层纹。主脉维管束分上下两排。上下维管束均有草酸钙砂晶体散在，晶体较细碎，当中有少量淀粉颗粒分布。横切面上下表皮均有淡褐色绒毛，由多细胞构成，外形类似泡沫[14]（表1）。 　　2.1.2血叶兰花瓣切面结构由图5、图6可知，血叶兰花瓣切面表皮最外层有淡褐色非腺毛，由多细胞构成，外形类似泡沫。在表皮位置有些部位发生了木栓化，木栓化细胞瘤状，2～3列，淡黑色。表皮细胞有1列，个体较小，多为圆形，排列紧凑，细胞外层披有薄薄一层角质层；表皮细胞内侧有厚角组织，由5～7列细胞组成，外形为不规则圆形。皮层细胞比较大，以多角型为主，细胞壁较为平直，排列致密，细胞之间间隔很小。细胞内含有大量的草酸钙结晶体，晶体形态小，单个存在；同时存在淀粉颗粒，数量不多，隐约见到脐点纹。维管束约15个，大小不统一，外韧形，间断环形排列，另有2个排列在细胞内侧。石细胞较小，壁厚，可见有纹孔，孔沟与断层纹不易见，形状