RNA结合蛋白ILF3在雌激素信号通路中的功能研究的中期报告.docx

RNA结合蛋白ILF3在雌激素信号通路中的功能研究的中期报告 研究背景： ILF3 (interleukin enhancer binding factor 3)是一种RNA结合蛋白，参与多种信号通路的调控。我们的前期研究发现，ILF3在雌激素信号通路中具有重要作用，但其具体机制仍不清楚。 研究目标： 本研究旨在进一步阐明ILF3在雌激素信号通路中的功能及机制，为深入理解该信号通路的调节机制提供依据。 研究方法： 通过文献调研和实验探索，我们计划采用以下方法： 1.体外RNA结合实验：利用电泳迁移实验确定ILF3与众多靶RNA结合的亲和力和特异性。 2.细胞系共转染实验：将ILF3和靶RNA共转染到细胞系中，利用荧光共定位和RNA免疫沉淀技术，探究二者相互作用的机制。 3.基因敲除实验：利用CRISPR-Cas9技术，敲除ILF3基因并通过Western blot验证敲除效果，探究其对雌激素刺激下细胞增殖的影响。 研究进展： 目前我们已完成体外RNA结合实验，确定了ILF3在雌激素信号通路中的多个靶RNA结合。同时，我们利用共转染实验，初步观察到ILF3与靶RNA的相互作用，并且发现ILF3在细胞质和核内的分布存在差异。我们正在进行CRISPR-Cas9敲除ILF3基因的实验，预计在近期完成。 研究意义： 本研究将对理解ILF3在雌激素信号通路中的作用机制有重要推动作用。同时，该研究可以为开发治疗乳腺癌等雌激素相关疾病的新药物提供借鉴。