生物样本样品前处理.ppt

关于生物样本样品前处理第1页，共15页，星期日，2025年，2月5日简介第2页，共15页，星期日，2025年，2月5日前处理技术1、直接稀释法：简单、回收率高、成本低，但选择性差，应用有限2、超滤法：多用于测定游离药物浓度3、蛋白沉淀法：几乎适用于所有小分子化合物，简单快速，回收率高，但选择性差，基质效应严重4、液液提取法：基质效应降低，低成本，重复性好；但难以自动化，不适用于水溶性化合物的提取，极性相差较大的化合物同时提取困难5、固相萃取法：可实现自动化，基质效应降低，同时完成样品的富集与净化；但成本较高第3页，共15页，星期日，2025年，2月5日液液提取法利用目标化合物在生物基质和与水不互溶的有机溶剂中溶解度或分配系数的不同，使化合物从生物基质中转移至有机相中。两相的分离需借助两相的密度差来实现原理：相似相溶分配系数：kA=yA/xAyA和xA分别表示在萃取相和萃余相中的质量比率选择性系数（分离系数）：β=kA/kB=萃取剂的选择：1、选择性好：表现为选择性系数大。2、萃取容量大：表现为分配系数大。3、萃取剂与原溶剂的互溶度。4、萃取剂和原溶剂有较大的密度差。5、化学稳定性耐酸耐碱、抗氧化还原、耐热、无腐蚀。6、安全性好。7、经济性好。Tips:PH和温度对萃取有一定影响。第4页，共15页，星期日，2025年，2月5日常用液液提取溶剂溶剂名称分子量沸点（℃）密度（g/mL)偶极矩（D)二氯甲烷84.9401.331.60乙酸乙酯88.177.10.901.78氯代正丁烷92.6770.89乙醚74.134.50.711.15戊烷72.236.10.630环己烷84.280.70.780正己烷86.2690.660.08甲苯92.2110.60.870.36异丙醇*60.182.40.791.66四氢呋喃*72.1660.891.63乙腈*41.181.60.783.92正丁醇*74.11171.001.50水*18.01001.001.84注：“*”表示与水互溶偶极矩越小，极性越小第5页，共15页，星期日，2025年，2月5日固相提取法

HLB(Hydrophilic-LipophilicBalanceCopolymer)材料的优点△水可浸润△反相保留△PH1-14范围内稳定△没有裸露硅羟基第6页，共15页，星期日，2025年，2月5日固相提取法第7页，共15页，星期日，2025年，2月5日固相提取法第8页，共15页，星期日，2025年，2月5日固相提取法改变化合物PH，酸性保留，碱性洗脱第9页，共15页，星期日，2025年，2月5日固相提取法改变化合物PH，碱性保留，酸性洗脱第10页，共15页，星期日，2025年，2月5日固相提取法改变吸附剂PH，碱性保留，酸性洗脱第11页，共15页，星期日，2025年，2月5日