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IGF-ImTOR信号通路调控猪骨骼肌卫星细胞增殖期生长差异的研究的开题报告

标题：IGF-ImTOR信号通路调控猪骨骼肌卫星细胞增殖期生长差异的研究

背景和研究意义：

骨骼肌是猪体内最主要的肌肉组织，其生长发育直接影响肉质品质。卫星细胞作为肌肉再生和生长的干细胞具有重要的生理作用。IGF-ImTOR信号通路作为调控细胞生长和代谢的关键通路，已被证明在肌肉生长和再生过程中发挥着至关重要的作用。然而，现有的研究主要集中在模式动物上，缺乏在生产性猪种上的验证。因此，本研究的意义在于深入探究IGF-ImTOR信号通路在猪骨骼肌卫星细胞增殖期生长差异中的作用和机制，为猪肉质品质的改良和生产性猪的效益提高提供理论依据和实践指导。

研究内容和方法：

本研究将从猪骨骼肌卫星细胞分离培养和体内转染两个层面入手，通过荧光素酶检测法和Westernblot法分析IGF-ImTOR信号通路调控猪骨骼肌卫星细胞增殖期生长差异的差异和机制。具体研究内容和方法如下：

第一部分：猪骨骼肌卫星细胞分离培养

1.1收集4只健康2月龄的皮特兔，分离其大腿肌，截取部位为股骨外髁及股骨头下的红色骨髓鞘。

1.2对分离得到的骨髓鞘进行胶原酶消化，并经过离心、遍洗、筛选、培养等步骤，获取纯化且高活性的骨骼肌卫星细胞。

1.3将细胞于含10%胎牛血清（FBS）的DMEM中培养，并进行克隆分离，筛选出单个克隆的骨骼肌卫星细胞系。

第二部分：IGF-ImTOR信号通路的Westernblot检测及荧光素酶检测法

2.1将培养好的骨骼肌卫星细胞系分别转染空载体和SiRNA针对IGF-ImTOR信号通路的基因，收集细胞株。

2.2采用Westernblot法检测各组细胞株的IGF-ImTOR信号通路相关蛋白水平和活性。

2.3采用荧光素酶检测法测定各组细胞株的增殖活性。

预期结果：

本研究预计通过猪骨骼肌卫星细胞分离培养和体内转染技术，深入解析IGF-ImTOR信号通路在猪骨骼肌卫星细胞增殖期生长差异中的调控作用和机制。结果将从分子水平进一步揭示肌肉生长的分子机制，并且为猪肉质的提高提供科学依据和实践指导。