猪脑心肌炎病毒基因组分子特征及其全长感染性cDNA克隆的构建的任务书.docx
猪脑心肌炎病毒基因组分子特征及其全长感染性cDNA克隆的构建的任务书
任务目标:
1.分析猪脑心肌炎病毒(PRCV)基因组分子特征,包括基因长度、组织分布、启动子、启动子区、编码区和终止子等特征。
2.从PRCV感染的细胞中提取RNA,制备cDNA文库,筛选出全长感染性cDNA克隆。
3.构建PRCV全长感染性cDNA克隆,验证其感染性和稳定性。
任务步骤:
1.收集PRCV基因组序列及相关文献资料,分析其特征。
2.根据特征,设计合适的引物和探针,从PRCV感染的宿主细胞中提取RNA。
3.使用RT-PCR方法将RNA转录为cDNA,并制备cDNA文库。
4.筛选和鉴定全长感染性cDNA克隆。
5.将全长感染性cDNA克隆插入表达载体中,构建全长感染性cDNA克隆重组病毒。
6.使用获得的重组病毒,验证其感染性和稳定性。
7.分析获得的全长感染性cDNA克隆在PRCV研究中的应用价值。
预期成果:
1.PRCV基因组特征分析报告。
2.RNA提取和cDNA文库制备的相关实验记录。
3.全长感染性cDNA克隆筛选和鉴定的相关实验记录。
4.全长感染性cDNA克隆重组病毒构建的相关实验记录。
5.全长感染性cDNA克隆重组病毒感染实验的相关实验记录。
6.全长感染性cDNA克隆在PRCV研究中的应用报告。