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工作汇报 杨伟平2015年11月13日 基质效应 在化学分析中，基质是指样品中待测物以外的组分。基质常常对待测物的分析过程有一定干扰，并影响结果的准确性。由于液质联用技术具有高灵敏度和高特异性的显著特点，所以广泛用于血药浓度的检测，但是因为质谱检测是基于化合物离子化并通过特定的质荷比来检测和定量，因此任何干扰待测物离子化的物质都能影响检测方法的灵敏度和选择性，即引入了基质效应的概念。它是指在样品测试过程中，由待测物以外的其它物质的存在，直接或间接影响待测物响应的现象 Bonfiglio R,King RC,Olah TV,Merkle K.The effects of sample preparation methods on the variability of the electrospray ionization response for model drug compounds[J].Rapid Commun.Mass Spectrom ，1999,13(12):1175-1185. Matuszewski BK,Constanzer ML,Chavez-Eng CM.Strategies for the assessment ofmatrix effect in qtitativeu an bioanalytical methods based on HPLC-MS/MS[J]. Anal. chem. ,2003 ,75(13):3019-3030. 两种评价基质效应的方法 由于基质效应对定量分析的准确度和精密度有一定影响，所以，实验过程中可通过一些有效的方法来消除基质效应。最常用的是通过改善样品前处理来最大限度地减少基质成分，样品前处理方法通常包括蛋白沉淀法、固相萃取法和液液萃取法等，当出现基质效应时，首先应当结合待测物的性质、生物样品的种类等因素来决定样品前处理方法，如在药代动力学实验中，常用血浆作为生物介质，血浆主要成分是蛋白质，一般来说，蛋白沉淀法可最大限度的除去蛋白质，但由于一些类脂类和盐类的存在，有时需进一步采用固相萃取或液液萃取法消除基质影响。同时，在选择蛋白沉淀法时，三氯乙酸、高氯酸等沉淀剂本身的酸碱度和无机杂质度对质谱检测器的影响较大，可能会降低回收率、增加变异，所以乙腈常是比较好的选择[44]。 由于产生基质效应的物质往往极性较大，经过反相色谱柱时出峰时间过早，所以通过改善色谱分离条件，避免分析物和基质成分出峰时间相同，也可以有效地消除基质影响[45]，一般建议保持分析物的容量因子k在2-5。 在内标的选择上，稳定同位素标记的类似物是液质联用法定量分析生物样品的最合适内标，因其与待测物在色谱行为、样品前处理及离子化方面几乎相同，利于减少基质效应的发生[47]。基质效应已成为生物样品定量分析中不可或缺的一部分，在具体实验中，往往需要将上述各方法结合使用才能有效地消除基制效应。 生物样本中钩藤碱的浓度测定及其动物体内药代动力学和 组织分布研究 工作曲线及定量下限 工作曲线是指在一定条件下，被测量值与仪器实际测得值之间关系的曲线。工作曲线和线性范围是含量准确测定的基础。定量下限是工作曲线上的最低浓度点，以5—10倍信噪比（S/N=10）时的样品浓度进行确定。本实验包括血浆样品及各组织样品的工作曲线制备。 黄酮类化合物组织分布研究进展 组织分布研究的一般方法 组织分布研究现在还是主要在大鼠、小鼠等动物身上进行。通常是实验动物按一定的给药方式,如灌胃、静脉注射、腹腔注射等,一定时间后(短至015h长至数周),处死动物,分离出组织,通常是心、肝、脾、肺、肾脑、胃肠道、体脂、骨骼肌等,有时重点分析与内分泌有关的组织如子宫、卵巢、乳腺、前列腺、垂体、睾丸等。 一般处理。目的是研究组织中受试药物的代谢物的浓度,包括原型药物与代谢物,样品处理方法较为复杂; (2)水解处理。目的是研究水解后释放的苷元及与之结合的内源性物质的结构。 水解通常有酶水解和酸水解,前者应用较多。 另外,匀浆处理组织样品时,应适当加入抗氧化剂,以防生物样品被氧化。 分析方法多种多样,常根据样品特点进行选择。孙学惠等[6]报道了药物检测新技术在药动学研究中的应用,具有一定参考价值。国外应用放射性同位素如14C、3H等标记技术研究组织分布较多,优点是灵敏度高、干扰小、可定位观察药物分布。从 质量守恒的角度考虑,放射性同位素标记技术研究组织分布,通过测定组织中药物及代谢物的浓度以及呼出14CO2的放射量,获得较高的回收率,可以更好的了解药物及代谢物在体内的情况。相信随着科学技术的发展,未来将有更好的分析技术用于解决组织分布研究,获得更加可靠、准确的结果。