《DNA复制帖航》PPT课件.ppt
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DNA 复制;DNA复制的研究发展;DNA复制的概念;Interphase is divided into the G1, S, and G2 periods. One cell cycle is separated from the next by mitosis (M). Cells may withdraw from the cycle into G0 or reenter from it.;DNA复制的概念;复制过程;二. 复制延伸;合成滞后链的DNA聚合酶III与合成前导链的DNA聚合酶III一样,由两个拷贝的聚合酶组成。事实上,它并非两个完整的酶,因为它只具有一个拷贝的?复合物;真核生物中与?复合物承担类似功能的是复制因子C(replication factor C, RFC)多亚基辅助蛋白承担。
;复制延伸;环状双链DNA复制方式;环状双链DNA复制方式;环状双链DNA复制方式;真核生物染色体端粒的复制;DNA 端粒复制时, 端粒酶催化逆向转录作用, 以酶中的RNA 为模板, 端粒的单链3’—OH 为引物, 不断进行反转录合成, 延伸3’—OH 端单链。在合成一个拷贝的重复序列后, 新合成的TG 链回折并借非标准碱基配对(G—G) 形成发夹结构, 从而调整了端粒酶的位置, 使逆转录能继续下去。当3’—OH 单链延伸到一定长度, 3’—OH 端作180度回转, 这时3’—OH单链又作为DNA 聚合酶的引物, 再以DNA 中富含G、T链为模板, 合成互补的富含C、A的DNA 片段, 以填补在DNA 末端复制时, 因RNA 引物被水解后留下的空隙 。最后在新合成的DNA5 端切去12 至16 个核苷酸, 形成完整的DNA 末端结构。;三. 复制的终止;三. 复制的终止;;Thank you!; DNA拓扑异构酶DNA topoisomerase:
通过切断并连接DNA双链中的一股或双股,改变DNA分子拓扑构象,避免DNA分子打结、缠绕、连环,在复制的全程中都起作用。
类型:拓扑异构酶I和拓扑异构酶II。拓扑异构酶I能切断DNA双链中一股并再连接断端,反应不需ATP供能;拓扑异构酶II能使DNA双链同时发生断裂和再连接,需ATP供能。
;Semi-conservative mechanism;大肠杆菌的DNA聚合酶
主要有三种:
DNA polymerase I: 1957年分离出来,由基因polA编码的单独一条多肽链;主要功能是参与DNA修复与复制
DNA polymerase II:由基因polB编码的单独一条多肽链;DAN修复
DNA polymerase III: 1972年发现,是大肠杆菌中最主要的DNA 聚合酶,具有多个亚单位
真核生物的DNA聚合酶:有?、?、?、?、?等多种
其中真核生物主要的DNA聚合酶是DNA polymerase ?,认为有2个亚基,其作用过程中还需要一种辅助蛋白质:增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen, PCNA),而PCNA的作用类似于DNA polymerase III中的?亚基,即起到滑动夹的作用。
DNA polymerase ?: 在真核细胞中是引发复制的酶,其最小的亚基可以合成RNA引物,约10个bp;然后再合成30个脱氧核糖核酸的延伸引物。
DAN polymerase ?: 主管线粒体基因组的复制
;酶
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