《常用试剂与培养基》.doc

第九章 微生物实验室常用试剂与培养基 第一节 常用试剂及其使用方法 一、诊断用纸片 1.杆菌肽纸片（0.04U/片），抑菌圈10mm为敏感。 质控菌株 A群链球菌阳性 D群链球菌阴性 2.SMZ纸片（1.25μg/23.75μg/片），出现抑菌圈即为敏感。 质控菌株 D群链球菌阳性 A群链球菌阴性 3.新生霉素纸片（5.0μg/片），抑菌圈≥16mm为敏感。 质控菌株 表皮葡萄球菌阳性 腐生葡萄球菌阴性 4.O129纸片、奥普托欣（Optochin）纸片参见第五节《生化试验培养基》。 二、诊断用血清 1.沙门菌属诊断血清 A-F群O多价血清 特异O群因子血清 常用的有O2，O4，O7，O9，O10 特异H因子血清 常用的有Ha，Hb，Hc，Hd，Hgm，Hi，Hf、Vi因子血清。 2.志贺菌属诊断血清 志贺菌属四种多价血清（含有痢疾志贺、福氏、宋内志贺） 痢疾志贺菌Ⅰ、Ⅱ血清。 福氏志贺菌多价血清及分型血清（1-6型）。 宋内志贺菌诊断血清（除光滑相抗血清外，能制备粗糙相抗血清）。 鲍氏志贺菌多价血清及分型血清。 3.致病性大肠埃希菌诊断血清 肠致病性大肠埃希菌（EPEC）诊断血清。 产肠毒素大肠埃希菌（ETEC）诊断血清。 肠侵袭性大肠埃希菌（EIEC）诊断血清。 肠出血性大肠埃希菌（EHEC）诊断血清O157：H7。 4.霍乱弧菌O1、O139混合多价诊断血清及稻叶、小川、彦岛O139分型血清。 5.脑膜炎奈瑟菌多价血清及分群血清。 6.链球菌分类诊断血清。 7.肺炎链球菌诊断血清。 8.耶尔森菌诊断血清。 三、常用染色液 (一)革兰染色液 1. 结晶紫溶液 A液 结晶紫 20g 95%乙醇 20ml B液 草酸铵 0.8g 蒸馏水 80ml 需在用前24小时将A液. B液混合,过滤后装入试剂瓶内备用。 2.碘液 碘 1g 碘化钾 2g 蒸馏水 300ml 将碘与碘化钾混合并研磨,加入几毫升水, 使其逐渐溶解,然后研磨,继续加入少量蒸馏水至完全溶解。最后补足水量。也可用少量蒸馏水将碘化钾完全溶解,再加入碘片,待完全溶解后,加水至300ml。 3.脱色液 95%乙醇 4.复染液 A贮存液 沙黄 2.5g 95%乙 100ml B应用液: A液 10ml 蒸馏水 90ml (二)抗酸染色液 1．碱性复红染色液 (1)萋纳石炭酸复红溶液 碱性复红乙醇饱和溶液 10ml 5%石炭酸溶液 90ml (2)脱色液 浓盐酸 3ml 95%乙醇 97ml (3)复染液(吕弗勒美蓝液) 美蓝乙醇饱和溶液 30ml 100g/L氢氧化钾 0.1ml 蒸馏水 100ml 2.金胺0-罗丹明B染色液 罗丹明B液 罗丹明B0.1g加蒸馏水100ml。 (2)1g/L金胺O液 金胺O液0.1g加蒸馏水95ml,再加入纯石炭酸 5ml,混匀。 (3)3%盐酸酒精 (4)稀释美蓝液 吕弗勒美蓝液100ml,加蒸馏水90ml,混匀。 (三)鞭毛染色液(改良Ryu法) A液 5%石炭酸 10ml 鞣酸 2g 饱和硫酸铝钾液 10ml B液 结晶紫酒精饱和液 应用液A液10份,B液1份,混合,室温存放备用。 (四)异染颗粒染色液 甲液 甲苯胺蓝 0.15g 孔雀绿 0.2g 95% 乙醇 2.0ml 蒸馏水 100ml 乙液 碘 2g 碘化钾 3g 蒸馏水 300ml 先将碘化钾加入少许蒸馏水(约2ml),充分振摇,待完全溶解,再中入碘,使完全溶解后, 加蒸馏水至300ml。 (五)荚膜染色液 1．印度墨汁或50g/L黑色素水溶液 2．5g/L苯胺兰水溶液 基础培养基 一、液体基础培养基 (一)蛋白胨水(Peptone water) 用途 1.供细菌靛基质试验用。 2.一般细菌培养和传代。 配法