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【2017年整理】分子生物学习题及答案(3,4,5章).doc

发布:2017-07-09约1.09万字共10页下载文档
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第3章 一.名词解释(考试时,名词解释为英文,要写出中文并解释) 1、复制(replication): 亲代双链DNA分子在DNA聚合酶的作用下,分别以每单链 DNA分子为模板,聚合与自身碱基可以互补配对的游离的dNTP,合成出两条与亲代DNA分子完全相同的子代DNA分子的过程。 2、复制子(replicon):也称复制单元,是基因组中具有一个复制起点(origin,ori)和一个复制终点(terminus,ter)并能在细胞中自主复制的基本单位。 3、半保留复制(Semi-Conservation Replication):DNA复制过程中亲代DNA的双链分子彼此分离,作为模板,按碱基互补配对原则,合成两条新生子链,这种方式称为半保留复制。 4、冈崎片段(Okazaki fragment) 冈崎片段是相对比较短的DNA链(大约1000核苷酸残基),是在DNA的后随链的不连续合成期间生成的片段,这是Reiji Okazaki在DNA合成实验中添加放射性的脱氧核苷酸前体观察到的,因此DNA的复制是半不连续复制。 5、DNA复制的转录激活(transcriptional activation):RNA聚合酶使双链DNA分子局部开链,在合成10~12个核苷酸的RNA片段之后,再由DNA聚合酶完成前导链DNA的合成,在完成近1000~2000个核苷酸的DNA合成后,后随链才在引发酶的作用下开始启动冈崎片段的引物RNA的合成,将这一过程称为DNA复制的转录激活。 单链DNA结合蛋白(single strand DNA binding protein,SSB):在复制中维持模板处于单链状态并保护单链的完整性。 复制体(replisome):DNA复制过程中的多酶复合体。 端粒(Telomere):是真核生物染色体末端的一种特殊结构,是为了保证染色体稳定的一段高度重复序列,呈现四股螺旋。 9、复制叉(replication fork): 复制开始,在复制起点形成的一个特殊的叉形结构,是复制有关的酶和蛋白质组装成复合物和新链合成的部位,这个部位称为复制叉。 10、半不连续复制(semi-discontinuous replication): DNA双链复制时,一条链是连续合成的, 另一条链是不连续合成的, 这种前导链的连续复制和后随链的不连续复制方式称DNA的半不连续复制。 11、先导链(leading strand): 又称前导链,是在复制叉处从5→3进行连续合成的一条子链。 12、后随链(lagging strand): 又称滞后链,复制方向与复制叉的方向相反,后随链的合成要等前导开始合成从而将其模板链暴露出来后,才得以进行。后随链上先合成了不连续的冈崎片段,然后在DNA聚合酶I的催化下切除RNA引物,同时填补切除RNA后的空隙,再在DNA连接酶的作用下,将冈崎片段连接成一条连续的DNA单链。 13、DNA连接酶: 是将DNA双链上的两个缺口同时连接起来的酶。若双链DNA中一条链有切口, 一端是3′-OH, 另一端是5′-磷酸基,连接酶可催化这两端形成磷酸二酯键,而使切口连接的酶。 14、回环模型: 滞后链绕酶一圈形成的环形,使得滞后链和前导链朝着同一方向沿复制叉进行。 二、问答题 1.大肠杆菌被T2噬菌体感染,当它的DNA复制开始后提取噬菌体的DNA,发现一些RNA与DNA紧紧结合在一起,为什么? 答:该DNA为双链并且正在进行复制。RNA片段是后随链复制的短的RNA引物。 2.描述滚环复制过程及其特征。 答:仅是特定环状DNA分子的复制方式。 (1)复制过程: 1)环状双链DNA的+链被内切酶切开; 2)以-链为模板,DNA聚合酶以+链的3端作为引物合成新的+链,原来的+链DNA分子的5端与-链分离; 3)+链的3端继续延长; 4)引发酶以离开的+链为模板合成RNA引物,DNA聚合酶以+链为模板合成新的-链; 5)通常滚环复制的产物是一多聚物,其中大量单位基因组头尾相连。 (2)复制过程的特征: 1)复制是单方向不对称的; 2)产物是单链DNA,但可通过互补链的合成转变为双链; 3)子代DNA分子可能是共价连接的连环分子; 4)连环分子随后被切成与单个基因组相对应的片段。 3.简述E.Coli DNA复制起始的主要步骤。 ⑴DNA合成在复制起点(oriC)的起始,Primase(引物酶)合成RNA引物。 ⑵DNA helicase (DNA 解旋酶)打开DNA双链,SSB结合单链DNA, DNA Gyrase(DNA促旋酶)引入负螺旋,减少正螺旋。 ⑶在DNA聚合酶III作用下,5’-3’合成前导链和后随链前体片段(冈崎片段)。 ⑷在DNA聚合酶I作用下,去除后随链前体片段5’端RNA引物,后随链前体片段间的缺口由DNA l
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