实验实验十、细菌的生理生化实验(二)资料.ppt

Company Logo LOGO Company name 实验十  细菌的生理生化反应 www.themegallery.co Company Logo 一、目的 1、了解糖发酵的原理和在肠道细菌鉴定中的重要作用； 2、了解吲哚、甲基红、伏-普反应的原理及其在肠道菌鉴定中的意义和方法。 www.themegallery.co Company Logo 二、基本原理 糖分解试验是常用的鉴别微生物的生化反应，在肠道细菌的鉴定上尤为重要。 绝大多数细菌都能利用糖类作为碳源和能源，但是它们在分解糖类物质的能力上有很大的差异。 发酵培养基含有蛋白胨，指示剂，倒置的德汉氏小管和不同的糖类。 www.themegallery.co Company Logo 当发酵产酸时，溴甲酚紫指示剂可由紫色（pH6.8）变为黄色（pH5.2）。 气体的产生可由倒置的德汉氏小管中有无气泡来证明。 吲哚、甲基红、伏-普这三个试验主要是用来快速鉴别大肠杆菌和产气杆菌，多用于水的细菌学检查。 大肠杆菌虽非致病菌，但在饮用水中若超过一定数量，则表示受粪便污染。 产气杆菌也广泛存在于自然界中，因此检查水时要将两者分开。 www.themegallery.co Company Logo 三、实验材料 1、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、变形杆菌等。 2、培养基：牛肉膏蛋白胨斜面培养基，PDA液体培养基、葡萄糖发酵培养基试管和乳糖发酵培养基试管、蛋白胨水培养基、葡萄糖蛋白胨水培养基 3、试剂：吕氏碱性美兰染色液、中性红染色液、碘液、甲 基红指示剂，40％KOH，5％α-萘酚，乙醚，吲哚试剂等。 4、仪器或其他用具： 显微镜、酒精灯、载玻片、盖玻片等。 www.themegallery.co Company Logo 四、操作步骤 1、细菌的生理生化反应： 将供试菌株分别接种在相应的培养液中，置适宜的温箱中恒温培养。在规定的时间内，选用相应的指示剂测定和观察试验结果。 （1）糖发酵试验 菌株 糖液中 培养 观察结果 www.themegallery.co Company Logo (2) v-p试验（伏-普试验） 菌株 葡萄糖蛋白胨水培养基 培养 取培养液2ml+2mlv-p试剂 混合均匀 37度培养30分钟 观察结果 (3)甲基红试验 菌株 葡萄糖蛋白胨水培养基 培养 取培养液2ml+2滴甲基红试剂 混合均匀 观察结果 (4)吲哚试验 菌株 蛋白胨水培养基 培养 取乙醚2ml加入到培养液 观察结果 www.themegallery.co Company Logo www.themegallery.co Company Logo www.themegallery.co Company Logo 吲哚试验 www.themegallery.co Company Logo www.themegallery.co Company Logo 乙酰甲基甲醇试验（伏-普试验） www.themegallery.co Company Logo www.themegallery.co Company Logo 五、实验报告 1、列表说明各供试菌对糖类的分解利用情 况和吲哚、甲基红、伏-普试验结果。 www.themegallery.co Company Logo 六、预习 实验十一、 微生物的数量测定 Company Logo LOGO Company name