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RNA干扰抑制NCAM140表达对GDNF保护多巴胺能神经元作用的影响的中期报告
RNA干扰(RNA interference,简称RNAi)是一种利用RNA分子介导特异性基因沉默和抑制的技术。本研究旨在通过RNA干扰抑制NCAM140(神经细胞粘附分子140)在GDNF(神经营养因子)保护多巴胺能神经元中的作用,以探究其对多巴胺能神经元的保护作用。
实验设计:将SPC转染为shRNA对NCAM表达的干扰RNA序列,并利用RT-PCR或Western blot检测NCAM的表达水平,同时通过细胞毒性实验和细胞存活率检测RNAi的安全性和有效性。接着,将GDNF和NCAM慢病毒共同转染至损伤的多巴胺能神经元培养物中,并观察细胞存活率,以研究NCAM在GDNF保护多巴胺能神经元过程中的作用。
实验结果:RNAi的实验结果表明,可通过SPC转染NCAM shRNA抑制NCAM140表达。GDNF与NCAM在损伤的多巴胺能神经元培养物中的共同转染结果显示,NCAM的表达水平下降,而细胞存活率明显提高,提示NCAM在GDNF保护多巴胺能神经元中具有负面作用。
结论:本研究结果表明,RNA干扰抑制NCAM140表达可以提高GDNF对多巴胺能神经元的保护作用,从而为深入探究神经退行性疾病的治疗提供理论基础和实验依据。
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