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学案 基因工程与克隆技术;基因工程相关知识整合;（1）基因工程诞生的理论基础和技术支持分别是什么？ 答案 ①理论基础：DNA是遗传物质；DNA双螺旋结构和中心法则的确立；遗传密码的破译。 ②技术支持：基因转移载体的发现；工具酶的发明；DNA体外重组的实现；重组DNA表达实验的成功。 ;（2）基因工程的基本操作步骤中哪几处用到了限制酶，其特性和来源是什么？又有哪几处涉及碱基互补配对？ 答案 限制酶在第1、2步中用到而且要求同一种，目的是产生相同的黏性末端；限制酶主要从原核生物中分离纯化而来，它能识别DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且切割两个核苷酸之间的磷酸二酯键，产生的末端有黏性末端和平末端；只有第三步将目的基因导入受体细胞不需碱基互补配对，其余三个步骤都涉及碱基互补配对。;（3）基因表达载体如何构建？ 答案;（4）将目的基因导入受体细胞的常用方法？ 答案 植物细胞：农杆菌转化法；动物细胞：显微注射法；微生物：Ca2+处理法。 （5）目的基因的导入与表达如何进行检测与鉴定？ 答案 ①分子水平检测 a.导入检测：DNA分子杂交技术，即使用放射性同位素标记的含目的基因的DNA片段作探针检测。 b.表达检测 ②个体生物学水平鉴定：对转基因生物进行抗虫或抗病的接种实验。; （09·沈阳质检）转基因植物油是由转基因植物通过压榨或浸出法加工制得的，因其出油率高而被广泛采用。我国是植物油消费大国，每年都从国外进口大量的转基因植物油。 （1）在培育转基因油料植物的过程中，基因操作需要的工具酶是 。在基因表达载体中，目的基因的首端必须含有 ，它是 识别和结合位点。 （2）请写出一种将目的基因导入油料植物细胞可以采用的方法： 。若受体细胞为植物体细胞，可采用 技术获得转基因植物体，该技术所依据的原理是 。;（3）若要检测（2）中获得的植物细胞染色体上是否含有目的基因，可采用 技术。而想要得知上述植物是否真的出油率高，应如何做？ 。 （4）若利用蛋白质工程继续提高油料植物???出油率，其设计流程应从预期的 出发，设计预期的 结构，推测出应有的 序列，然后找到相对应的 序列，再用转基因技术改变其现有性状。;关键信息 “工具酶”、“植物细胞”、“原理”、“染色 体上”、“预期” 知识依据 基因工程和蛋白质工程 完整分析 （1）转基因植物的培育过程中，基因工 具酶是限制性核酸内切酶和DNA连接酶，目的基因 只有含有启动子，才能被RNA聚合酶识别并与之结 合进行转录。（2）接受目的基因的受体细胞若为植 物体细胞，可采用植物组织培养技术获得转基因植物。 （3）通过对比转基因植物与普通的非转基因植物的 出油率，可得知转基因植物是否真的出油率高。 （4）蛋白质工程设计流程是：预期蛋白质的功能→ 设计预期的蛋白质结构→推出应有的氨基酸序列→找 到相应的脱氧核苷酸序列。;植物组织培养和植物体细胞杂交;（1）上述两过程依据的原理是什么？ 答案 植物组织培养：细胞全能性；植物体细胞杂交：细胞膜的流动性和细胞的全能性。 （2）在植物体细胞杂交过程中，原生质体经诱导剂处理后，会有几种细胞类型？ 答案 5种：甲、乙、甲甲、乙乙、甲乙; 野生马铃薯品种的植株具有较强的抗病、抗虫、抗盐碱、抗寒能力，但块茎不能食用。俄、德、芬兰专家共同做实验研究，用野生马铃薯与马铃薯的体细胞进行杂交，培育出了生活能力强的杂交系马铃薯。据图分析回答问题： ;（1）①过程植物细胞原生质体的分离需经过酶解，其中 “酶解”所用的酶应该包括 。 （2）②过程可用聚乙二醇（PEG），其目的是 。 （3）请用文字和箭头表示出④⑤技术过程的实验流程： 。由此过程 可以看出植物细胞有形成完整个体的可能性，这是 。 （4）在培养基上培养一段时间后，原生质体会再生出细 胞壁。可以取样，通过 实验来鉴别细胞壁是否已经再生。;（5）请说明运用植物体细胞杂交法的最大好处： 。; 图示动物细胞培养、细胞核移植和单克隆抗体制备过程，并思考以下问题。;;;（1）上述过程的原理是什么？ 答案 ①动物细胞培养：细胞增殖；②细胞核移植:细胞核全能性；③单克隆抗体的制备原理：a.免疫原理：经免疫的B淋巴细胞产生特异性抗体。b.增殖原理：骨髓瘤细胞能在体外培养的条件下大量增殖。 c.融合原理：细胞膜的流动性以及病毒对宿主细胞的穿透性。 （2）区分原