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短小芽孢杆菌和乳酸肠球菌对银鲑幼鱼的影响
摘要要
先前我们在采用具有高产蛋白酶活性的短小芽孢杆菌和乳酸肠
球菌发酵豆粕替代鱼粉的研究中,发现银鲑幼鱼的健康和生长明显
改善,为了明确两株菌本身的应用价值,并为本土银鲑养殖应用提
供参考,本研究以短小芽孢杆菌和乳酸肠球菌分别作为饲料添加剂
进行银鲑幼鱼养殖实验,旨在评估它们对银鲑生长、营养代谢、免
疫功能和肠道菌群的影响。实验基础饲料以鱼粉、大豆粕、花生粕、
虾粉、鸡肉粉为蛋白源,以鱼油和大豆油为脂肪源。短小芽孢杆菌
实验组以基础饲料为对照(G0),在基础饲料中添加三种不同浓度
的菌体:2×106CFU/g(G1)、4×108CFU/g(G2)、8×1010CFU/g
(G3)。乳酸肠球菌实验组以基础饲料为对照(T0),在基础饲料中
添加三种不同浓度的菌体:2×106CFU/g(T1)、4×108CFU/g(T2)、
8×1010CFU/g(T3)。养殖10周后进行取样检测,结果如下:
一、生长性能方面。结果显示,与对照组相比,添加4×108
CFU/g短小芽孢杆菌和乳酸肠球菌均能显著提高银鲑幼鱼的终末体
重、增重率(WGR)和特定生长率(SGR),降低饲料系数(FCR)
(P0.05),对摄食量(FI)、成活率(SR)、肝体比(HSI)没有显
著影响(P0.05)。银鲑肌肉近似成分结果表明,短小芽孢杆菌和
乳酸肠球菌显著提高了肌肉中的粗蛋白、粗脂肪含量,降低了水分
含量(P0.05),灰分含量不显著(P0.05)。
二、营养代谢方面,短小芽孢杆菌和乳酸肠球菌均提高银鲑幼
鱼血清中的总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、高密度脂蛋白胆固醇
(HDLC)含量,降低总胆固醇(T-CHO)、甘油三酯(TG)、低密
度脂蛋白胆固醇(LDLC)含量(P0.05),显著提高肠道脂肪酶、
胃蛋白酶、胰蛋白酶、α-淀粉酶活性(P0.05)。根据肌肉近似成分
析结果,进一步选取蛋白代谢和脂肪代谢相关通路进行测定,结果
显示,投喂短小芽孢杆菌和乳酸肠球菌均能显著诱导银鲑幼鱼肝脏
mTOR蛋白合成信号通路中核糖体蛋白S6激酶1(S6K1)
、丝氨酸/
、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、雷帕霉素靶蛋白
苏氨酸激酶(AKT)
(mTOR)基因和PPARα/SREBP脂肪代谢信号通路中乙酰辅酶A羧
化酶(ACC)
、固醇调节元件结合蛋白1(SREBP1)、脂肪酸合成酶
I
、肉毒碱棕榈酰转移酶1(CPT1)、过氧化物酶体增殖物激活
(FAS)
受体α(PPARα)基因的相对表达量上调(P0.05)。
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二、免疫功能方面。结果显示,添加4×10CFU/g短小芽孢杆菌
和乳酸肠球菌均能提高银鲑幼鱼血清中碱性磷酸酶(AKP)、酸性磷
酸酶(ACP)、溶菌酶(LZM)的活性,降低血清葡萄糖(GLU)含
量,显著提高银鲑幼鱼肝脏中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶
(CAT)、总抗氧化能力(T-AOC)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)
酶活性,降低脂肪过氧化产物丙二醛(MDA)的含量(P0.05)。
选取TLR/NF-κB信号通路中部分免疫和炎症反应相关基因进行测定,
结果显示,添加短小芽孢杆菌和乳酸肠球菌能显著上调银鲑幼鱼肠
道中免疫相关基因Toll样受体7(TLR7)
、溶菌酶(LZM)、Toll样受
体3(TLR3)
、转化生长因β1(TGFβ1)、热休克蛋白70