胆红素的制备与质量检测.ppt

实验三、胆红素的制备及质量检测;原理;材料及试剂;工艺、步骤;2、碱解：在反应锅中搅拌下加热至60-70℃,用8%左右的氢氧化钠液缓慢调节pH至10.5-11.5 1（偏低，皂化反应不完全，影响产量；偏高则易影起氧化，分层困难）。继续搅拌加热到90 ℃,保温10分钟（注意勿使泡沫溢出） 。然后停止加热，取下冷却到30℃左右。;3、酸化、抽提： 加入皂化液30%的氯仿量，混合均匀，用1：5盐酸边加边搅拌调pH至3.8-4.1 。 注： （1）pH过低不易分层，影响产量； pH过高则易氧化，分层困难，有包裹现象，产量不高。 （2）加盐酸要慢，搅拌充分、均匀；否则易影起局部酸化过度，影响产量。大约100ml皂化液加10ml左右，不能过大或过小，否则结块。溶液由奶黄变成棕黄色 。;4、蒸馏、干燥： 将以上氯仿抽提液移入蒸馏瓶中，置85 ℃水浴中蒸馏，回收氯仿。当瓶内无气泡，呈桔红色、瓶口氯仿气味???弱时，加入少量的95%乙醇继续蒸发，至氯仿全部蒸出。趁热过滤，并用65 ℃的95%乙醇冲洗一次，取出沉淀，干燥，置棕色瓶中保存。;二、产品的检测;（2）薄层色谱 取本品，加三氯甲烷制成每1ml含0.1mg的溶液，作为供试品溶液。另取胆红素对照品同法制成对照品溶液。吸取上述两种溶液各1Oμl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-冰醋酸（10:1:0.5）为展开剂，展开，取出，晾干。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。 ;2、干燥失重检查 取本品约0.5g，五氧化二磷60℃减压干燥4小时，测减失重量。 3、含量测定 取〔吸收曲线〕项下溶液，在453nm的波长处测定吸光度，按胆红素的吸收系数（ ）1038计算，得胆红素含量。;结果与分析