实验三、胆红素的提取.ppt

实验三、胆红素的提取 胆红素存在于胆汁中，为胆结石的主要成分，是配制人工牛黄的主要原料。很多中成药都以人工牛黄为重要组成成分。 原理 80%的以双葡萄糖醛酸胆红素酯的形式存在，用氢氧化钠溶液碱解，生成溶于水的胆红素钠盐。当用稀盐酸进行酸化时，生成游离的胆红素分子，因其溶于氯仿面被提取出来。 材料及试剂 1、胆汁：新鲜或解冻的胆汁。 2、盐酸：调节PH 值，提供氢离子。 3、氢氧化钠：进行皂化反应。 4、氯仿：用作溶剂，提取胆红素。 5、乙醇：脱水剂。 工艺、步骤 1、过滤：取胆，剪破，双层纱布过滤除去杂质及油脂，称重。 2、碱解：在反应锅中搅拌下加热至60-70℃,用8%左右的氢氧化钠液缓慢调节pH至10.5-11.5,继续搅拌加热到90 ℃,保温10分钟。（注意勿使泡沫溢出）然后停止加热，取下冷却到30℃左右。 3、酸化、抽提： 加入30%的氯仿量，混合均匀，用1：5盐酸边加边搅拌调pH至3.8-4.1 。（加盐酸要慢，大约100ml皂化液加10ml左右，不能过大或过小，否则结块。溶液由奶黄变成棕黄色。 ） 移入分液漏斗中静置20-30分钟，即分为二层，上层为胆酸和水溶液，下层为黄色的氯仿抽提液。上层胆酸液可用30%氯仿抽提1次，合并下层液。 4、蒸馏、干燥： 将以上氯仿抽提液移入蒸馏瓶中，置85 ℃水浴中蒸馏，回收氯仿。当瓶内无气泡，呈桔红色、瓶口氯仿气味很弱时，加入少量的95%乙醇继续蒸发，至氯仿全部蒸出。趁热过滤，并用65 ℃的95%乙醇冲洗一次，取出沉淀，干燥，置棕色瓶中保存。 结果与分析 1、干燥后称重，计算得率。 2、简要说明工艺的关键控制点。 说明 1、皂化反应PH值必须控制在10.5-11.5,偏低，皂化反应不完全，影响产量。偏高则易影起氧化，分层困难。 2、酸化pH值控制在3 .8-4.1。酸化过低不易分层，影响产量。酸化过高则易氧化，分层困难，有包裹现象，产量不高。 另外，酸化速度要慢，搅拌充分、均匀；否则易影起局部酸化过度，影响产量。 * * *