CNIH4通过PI3K_Akt信号通路对胶质瘤进展的影响.pdf
摘要
摘要
目的:
通过研究CNIH4在胶质瘤中的表达情况以及与患者预后的关系,分析
CNIH4表达对胶质瘤相关生物学功能的影响;最后,探讨及验证CNIH4和
PI3K/Akt信号通路在胶质瘤进展中的关系。
方法:
1CGGA
、从中国脑胶质瘤基因组图谱计划()数据库中下载脑胶质瘤样本
的转录组数据及其临床资料进行研究,下载并应用来自癌症基因组图谱计划
TCGACNIH4
()数据库的脑胶质瘤患者有关的表达、生存率和临床特征的数
据进行验证。
2、利用qRT-PCR、Westernblot检测胶质瘤组织及其相应的癌旁组织样本中
CNIH4的表达量。
3qRT-PCRWesternblotCNIH4NHA
、用、检测,在正常人星形胶质细胞、
LGG细胞系(SW1088、SW1783和BT142)和HGG细胞系(U87、U251和LN229)
的表达差异;
4、选择CNIH4表达量适合的细胞系,构建下调CNIH4的细胞模型,用
Westernblot、qRT-PCR进行验证并检测CNIH4表达水平的差异;
5CCK-8EdUTranswell
、通过实验、实验、平板克隆实验、划痕愈合实验和
CNIH4U251LN229
侵袭实验检测下调后对和胶质瘤细胞增殖、迁移和侵袭能
力的影响;
6WesternblotCNIH4PI3K/Akt
、法检测下调细胞模型中通路相关蛋白表达
水平的变化。
结果:
1CNIH4CNIH4
、在胶质瘤中表达升高,且基因表达越高,预后越差。单
因素和多因素Cox回归分析显示,CNIH4表达是胶质瘤患者独立的预后因素。
我们还发现,在胶质瘤患者中,CNIH4表达与免疫相关信号、免疫细胞浸润、
免疫反应调控及化疗反应密切相关。
2qRT-PCRWesternblotCNIH4
、、结果证实胶质瘤患者的癌组织蛋白表达
II
摘要
较对应癌旁正常组织明显增高,差异有统计学意义(P0.05)。癌组织较对应癌旁
正常组织的CNIH4mRNA明显增高,差异有统计学意义(P0.01)。
3qRT-PCRWesternblotCNIH4
、、结果证实多种胶质瘤细胞系蛋白表达较
正常人星形胶质细胞(NHA)明显增高,差异有统计学意义。胶质瘤细胞系较
NHACNIH4mRNAU251
的明显增高,差异有统计学意义。而且这种差异表