实验用培养基适用性检查标准操作规程方案.doc

起草人 Prepared by: 起草日期 Date: _____________________ QC 审核Reviewed by: 审核日期Date: _____________________ QC 审核Reviewed by: 审核日期Date: QA 批准人Approved by: 批准日期Date: 质量部QD 颁发部门 Issued by 执行日期 Effective Date 替换文件 Replaced For SP-QC-562-02实验用培养基适用性检查标准操作规程 复审日期 Review Date 分发部门： Distributed to 分发号Distribution No.: 目的 Purpose 为保障微生物检验的准确性及相关工作特制定本规定。 范围 Scope 本程序适用于微生物限度测定培养基的及相关工作。 职责 Responsibility 分析员：严格按照本操作规程执行。及时完成各类相关记录。在主管的指导下进行任何可能的OOS及偏差调查。 主管：监督本操作规程的执行。对员进行必要的培训。指导任何可能的OOS和偏差调查。 procedure 检验员应根据培养基各自的说明书配制培养基。 试验用菌种及培养基 菌种: 培养基灵敏度测试所用的菌株传代次数不得超过5代，从国家药检所购买。 枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)[6633] 大肠埃希菌(Escherichia coli) [] 金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus) [] 白色念珠菌(Candida albicans) [] 黑曲霉(Aspergillus niger)[] 伤寒沙门菌(Salmonella) [] 铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa) [] 培养基 按照培养基说明书进行配制灭菌。 大豆酪蛋白消化肉汤 Soybean-Casein Digest Broth 大豆酪蛋白消化琼脂 Soybean-Casein Digest Agar 沙氏葡萄糖琼脂 Sabouraud Dextrose Agar 肠道菌增菌肉汤 Enterobacteria Enrichment Broth Mossel 紫红色胆汁葡萄糖琼脂 Violet Red Bile Glucose Agar 麦康凯肉汤 MacConkey Broth 麦康凯琼脂 MacConkey Agar RV沙门氏菌富集肉汤 Rappaport Vassiliadis Salmonella Enrichment Broth 木糖赖氨酸脱氧胆盐琼脂 Xylose Lysine Deoxycholate Agar 甘露醇氯化钠琼脂培养基 Mannitol Salt Agar 微生物计数培养基的 微生物计数用的成品培养基、由脱水培养基或按处方配制的培养基均。 菌悬液的制备 名称 金黄色葡萄球菌CC 6538 铜绿假单胞菌CC 9027 菌株制备 大豆酪蛋白消化肉汤大豆酪蛋白消化 30℃-35℃，18-24小时 大豆酪蛋白消化肉汤大豆酪蛋白消化 30℃-35℃，18-24小时 名称 枯草芽孢杆菌CC 6633 白色念珠菌CC 10231 菌株制备 大豆酪蛋白消化肉汤大豆酪蛋白消化 30℃-35℃，18-24小时 沙氏葡萄糖琼脂 20℃-25℃，2-3天 名称 黑曲霉CC 16404 菌株制备 沙氏葡萄糖琼脂20℃-25℃，5-7天 或者直到形成良好的孢子状态 上述培养物用0.9%无菌氯化钠溶液制成每1ml含菌数100cfu的菌悬液，制备黑曲霉孢子悬浮液时，添加3-5ml含0.05%（ml/ml）聚山梨酯80的0.9%无菌氯化钠溶液，将孢子洗脱。然后，用适宜方法吸出孢子悬液至无菌试管内，用含0.05%（ml/ml）聚山梨酯80的0.9%菌氯化钠溶液制成每1ml含孢子数100cfu的孢子悬液。菌悬液在室温下放置应在2小时内使用，若保存在2～8℃可在24小时内使用。黑曲霉孢子悬液可保存在2-8℃，在验证过的贮存期内使用。 大豆酪蛋白消化肉汤促生长试验 取以上前3种菌悬液100cfu)，分别注入灭过菌的含有10ml大豆酪蛋白消化肉汤的试管中，于30℃-35℃培养不超过3天。同时用相应的上一批通过促生长试验的培养基